[发明专利]糖苷水解酶及其在预防和/或治疗动物中的病原体感染中的用途

说明书

公开了使用糖苷水解酶，例如α‑L‑岩藻糖苷酶，来预防和/或治疗动物中的病原体感染和/或腹泻的方法和组合物，其中所述病原体感染由能够结合动物肠细胞的病原体引起，其中所述病原体的结合依赖于病原体结合位点的存在，所述病原体结合位点具有被至少一个α‑1,2‑L‑岩藻糖部分取代的至少一个聚糖结构，所述方法包括向所述动物施用有效量的能够从所述病原体结合位点去除至少一个α‑1,2‑L‑岩藻糖部分的糖苷水解酶。

本申请要求2015年9月2日提交的美国临时申请号62/213564的权益，该临时申请通过引用以其全文结合在此。

发明领域

本领域涉及糖苷水解酶，例如α-L-岩藻糖苷酶，并且具体地涉及它们在预防和/或治疗动物中的肠道病原体感染和/或腹泻中的用途。

背景技术

抗生素在治疗人类和动物方面的使用导致了抗微生物抗性，现在已成为全球主要的健康威胁。因此，正在寻求开发抗生素替代品以解决该全球健康问题。

消费者非常关心抗生素在动物饲料中的广泛使用。零售商和农民将需要响应于消费者对无抗生素肉类的偏好的这种变化而进行改变。

产肠毒素大肠杆菌(E.coli)(ETEC)是幼畜(例如猪和小牛)中最常见类型的大肠杆菌病，通常表现为严重的水泻。这也是旅行者中腹泻(“旅行者腹泻”)和发展中国家儿童腹泻的重要原因。

已知几乎所有的ETEC细菌都通过蛋白质表面附属物(菌毛(fimbriae和pili))或通过非菌毛蛋白粘附于小肠上皮细胞上的受体。此外，它们分泌蛋白毒素(肠毒素)以减少吸收并增加小肠上皮细胞的液体和电解质分泌。肠毒素局部作用于肠细胞。动物中ETEC感染和腹泻的流行病学、发病机理、诊断和预防的细节可见于以下文献中：Nagy和Fekete(1999)，Vet Res.[兽医研究]30:259-84。

更具体地说，已经发现ETEC和肠毒血症(ETEEC)大肠杆菌(F18⁺E.Coli)表达F18菌毛，所述F18菌毛在小肠中定殖并且在非常年幼的动物(例如仔猪和小牛)中引起腹泻，并且其是第三世界中人类死亡的一个主要原因。通过防止这类病原体对动物肠细胞的菌毛粘附，可以建立对这类疾病的保护。因此，有必要找到新的替代方法来预防和治疗病原体感染，例如ETEC。

发明内容

在一方面，公开了一种预防和/或治疗动物肠道病原体感染和/或腹泻的方法，其中所述病原体感染和/或腹泻由能够结合动物肠细胞的病原体引起，其中所述病原体的结合依赖于病原体结合位点的存在，所述病原体结合位点具有被至少一个α-1,2-L-岩藻糖部分取代的至少一个聚糖结构，所述方法包括向所述动物施用有效量的能够从所述病原体结合位点去除至少一个α-1,2-L-岩藻糖部分的糖苷水解酶。在一些方面，所述糖苷水解酶是α-L-岩藻糖苷酶。

在另一方面，单独地或者与能够(a)将血型A抗原转化为血型H抗原或(b)将血型B抗原转化为血型H抗原的酶组合，所述α-L-岩藻糖苷酶能够从含有聚糖的结构中除去末端α-1,2-连接的岩藻糖基团。更具体地，所述α-L-岩藻糖苷酶选自糖苷水解酶家族95(GH95)和糖苷水解酶家族29(GH29)。

在第三方面，所述病原体是表达F18菌毛的大肠杆菌。

在第四方面，所公开的方法进一步包括向所述动物单独地或与至少一种蛋白酶组合施用有效量的与至少一种直接饲喂的微生物组合的α-L-岩藻糖苷酶，并且此外，所述α-L-岩藻糖苷酶是包入胶囊内的。

在第五方面，所公开的方法进一步包括，所述α-L-岩藻糖苷酶(无论包入胶囊内的还是未包入胶囊内的)和/或所述直接饲喂的微生物和/或所述蛋白酶在动物饲料或预混物中施用。此外，所述α-L-岩藻糖苷酶(无论包入胶囊内的还是未包入胶囊内的)都可以是呈用于动物饲料或预混合物的颗粒形式。