[发明专利]用于测量色氨酸及其代谢物的同位素方法

权利要求书

1.一种测量色氨酸和其一种或多种代谢物的方法，其中，所述方法包括：

a)用一种或多种质量标签标记一种或多种测试样品；

b)用一种或多种另外的质量标签标记色氨酸和其一种或多种代谢物的纯化或合成制品以形成参照样品，其中，所述另外的质量标签是步骤a)中使用的相同质量标签的同量异序或同位素变体；

c)以预定比例将步骤a)的一种或多种标记的测试样品和步骤b)的参照样品混合以形成一种或多种分析混合物；

d)通过质谱法分析所述一种或多种分析混合物，其中，通过将色氨酸和其一种或多种代谢物的期望质荷比处的信号强度与所述参照样品中色氨酸和其一种或多种代谢物的质荷比处的相应信号强度比较来确定所述测试样品中色氨酸和其一种或多种代谢物的量；

其中，所述色氨酸是L-色氨酸、D-色氨酸、1-L-甲基-色氨酸或1-D-甲基色氨酸中的至少一种；和其中所述色氨酸的一种或多种代谢物包括L-犬尿氨酸、D-犬尿氨酸、1-L-甲基-犬尿氨酸或1-D-甲基-犬尿氨酸中的至少一种；且

其中，包含色氨酸和其一种或多种代谢物的所述参照样品被胺反应性质量标签标记，所述胺反应性质量标签增强质谱中的信号强度。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述质量标签为同量异序标签。

3.根据权利要求1所述的方法，其中，所述质量标签为同位素质量标签。

4.根据权利要求1所述的方法，其中，所述质量标签是包含氢、碳、氮和/或氧的一个或多个重同位素取代的二甲基哌啶-β-丙氨酸衍生物。

5.根据权利要求1所述的方法，其中，所述方法使用色氨酸和其代谢物的一个或多个转换而通过选择性反应监测来进行；其中，所述方法包括：

i.将所述一种或多种测试样品中色氨酸和其代谢物的量与先前确定的量进行比较；或

ii.将所述一种或多种测试样品中色氨酸的量与两种或更多种色氨酸代谢物的量的比例进行比较；

其中，所述方法进一步包括在所述一种或多种测试样品中确定色氨酸代谢的速率和/或程度。

6.根据权利要求5所述的方法，其中，步骤i)包括用已知量的相应合成色氨酸和其代谢物确定所述一种或多种测试样品中色氨酸和其代谢物的量，所述已知量的相应合成色氨酸和其代谢物与所述一种或多种测试样品中存在的那些色氨酸和其代谢物相同，但具有不同的同量异序或同位素质量标签。

7.根据权利要求6所述的方法，其中，不同的质量标签在结构上不同或者包含氢、碳、氮和/或氧的不同的重同位素取代。

8.根据权利要求1所述的方法，其中，所述样品选自血液、血浆、血清、唾液、尿液、组织或其组合。

9.用质量标签标记的色氨酸和其一种或多种代谢物在制备用于监测受试者治疗有效性的试剂盒中的用途，所述监测通过根据权利要求1至7中任一项所述测量色氨酸和/或其代谢物的水平来进行，其中所述质量标签是增强质谱中的信号强度的胺反应性质量标签。

10.根据权利要求9所述的用途，其中，所述治疗是癌症治疗。

11.用质量标签标记的色氨酸和其一种或多种代谢物在制备用于通过根据权利要求1至7中任一项所述测量色氨酸和其代谢物的水平来分层受试者的试剂盒中的用途，其中所述质量标签是增强质谱中的信号强度的胺反应性质量标签。

12.根据权利要求11所述的用途，其中，将所述受试者分层以用于临床试验。

13.用质量标签标记的色氨酸和其一种或多种代谢物在制备用于通过根据权利要求1至7中任一项所述测量色氨酸和其代谢物的水平来监测受试者在治疗后癌症复发的试剂盒中的用途，其中所述质量标签是增强质谱中的信号强度的胺反应性质量标签。