[发明专利]基于人呼吸道合胞病毒(HRSV)病毒样颗粒(VLPS)的疫苗

权利要求书

1.一种病毒样颗粒(VLP)，其包括：

至少一种人偏肺病毒基质(M)蛋白；以及

一种融合前呼吸道合胞病毒(RSV)弗林(F)蛋白和一种融合后RSV F蛋白，

其中，所述融合前RSV F蛋白的跨膜结构域和/或胞质结构域被来自hMPV F蛋白的氨基酸序列替换，

其中融合前RSV F蛋白包含基于SEQ ID NO:1的以下取代：A102C、I148C、S155C和S290C，和

其中融合前RSV F蛋白在弗林蛋白酶切割位点SEQ ID NO:1氨基酸残基106-109的RARR修饰成SEQ ID NO:5的KAHQ和在弗林蛋白酶切割位点SEQ ID NO:1氨基酸残基133-136的RKRR修饰成SEQ ID NO:7的KKQH。

2.如权利要求1所述的病毒样颗粒，其中，所述RSV F蛋白和hMPV M蛋白经密码子优化。

3.如权利要求1所述的病毒样颗粒，其中，所述RSV F蛋白通过连接肽序列连接到所述人偏肺病毒M蛋白序列。

4.如权利要求1所述的病毒样颗粒，还包括一种或多种G蛋白和/或一种或多种SH蛋白。

5.一种DNA构建体，其包含用于组装如权利要求1-2中任一项所述病毒样颗粒的肺炎病毒蛋白的编码序列，所述DNA构建体包含hMPV和RSV蛋白的编码序列。

6.一种生产病毒样颗粒的方法，所述方法包括：在使宿主细胞生产所述病毒样颗粒的条件下，将如权利要求5所述的一个或多个DNA构建体导入所述宿主细胞。

7.如权利要求6所述的方法，其中，所述细胞培养于25℃～37℃的温度范围内。

8.用权利要求6或7所述的方法产生的病毒样颗粒。

9.一种免疫原性组合物，其包含至少一种权利要求1-2或8中任一项所述的病毒样颗粒，还包含佐剂。

10.如权利要求9所述的免疫原性组合物，用于在对象中产生对偏肺病毒和/或呼吸道合胞病毒的免疫应答。

11.如权利要求10所述的免疫原性组合物，其中，所述组合物经粘膜、皮内、皮下、肌肉内或口服给予。

12.如权利要求10或11所述的免疫原性组合物，其中，所述免疫应答使得所述对象对偏肺病毒和/或呼吸道合胞病毒的多种血清型或进化支获得免疫。

13.如权利要求10-12任一项所述的免疫原性组合物，其中，所述对象是人。