[发明专利]重组李斯特菌疫苗菌株及其用于癌症免疫疗法的方法

说明书

本发明提供了治疗宫颈癌的方法，所述方法包括向受试者施用包含表达人乳头瘤病毒抗原的重组李斯特菌的组合物的步骤。在另一个实施例中，本发明提供了治疗宫颈癌的方法，所述方法包括施用包括化放疗疗法和表达人乳头瘤病毒抗原的重组李斯特菌菌株的联合疗法的步骤。

技术领域

本发明提供了治疗宫颈癌的方法，所述方法包括向受试者施用包含表达人乳头瘤病毒抗原的重组李斯特菌的组合物的步骤。在另一个实施例中，本发明提供了治疗宫颈癌的方法，所述方法包括施用包括化放疗疗法和表达人乳头瘤病毒抗原的重组李斯特菌菌株的联合疗法的步骤。

背景技术

单核细胞增多性李斯特菌(Listeriamonocytogenes)(Lm)是一种食源性革兰氏阳性菌，偶尔会在人类尤其是老年人、新生儿、孕妇和免疫低下个体中导致疾病。除了强烈激活先天免疫并诱导增强抗原呈递细胞(APC)功能的细胞因子应答外，Lm还能够在从吞噬溶酶体逃离后在APC的胞质溶胶中复制，这主要是通过李斯特菌溶血素O(LLO)蛋白的作用。这种独特的胞内生命周期使得由Lm分泌的抗原可在MHC I类和II类分子的背景下加工和呈递，从而导致强效的细胞毒性CD8⁺和Th1 CD4⁺T细胞介导的免疫应答。Lm已在临床前模型中作为癌症免疫疗法的载体得到了广泛研究。Lm-LLO-E7对小鼠免疫引起了表达E7的已建立的肿瘤的消退，并赋予了长期保护。Lm-LLO-E7的疗效与其以下能力相关：诱导浸润肿瘤部位的E7特异性CTL、成熟树突细胞，减少瘤内调节性CD4⁺CD25⁺T细胞的数量以及抑制肿瘤血管发生。

Lm作为免疫疗法载体还具有许多固有的优点。细菌在体外非常有效地生长而无特殊要求，并且其缺乏LPS，这是在革兰氏阴性菌诸如沙门氏菌(Salmonella)中的主要毒性因子。基因减毒的Lm载体就严重不良反应而言还提供额外的安全性，因为它们可容易地通过抗生素消除，并且不同于某些病毒载体，遗传物质不整合进宿主基因组。

高致癌风险人乳头瘤病毒(HR-HPV)型持续感染被视为是宫颈浸润癌(ICC)必要但非充分的原因。HPV 16和18是恶性病变中最普遍的类型，占ICC的70％以上，高等级前期病变的50％以上。HR-HPV E6和E7蛋白在发育异常和癌中一致表达，分别破坏细胞周期调控蛋白p53和pRb。发育异常和浸润性恶性病变对E6和E7的强制性表达以及这些蛋白的病毒性来源使得它们成为HPV治疗性疫苗的优异靶标。

宫颈癌是全世界女性最常见的癌症之一。但在美国和其他定期进行宫颈癌筛查的国家，这种癌症并不常见。大多数宫颈癌由称为人乳头瘤病毒或HPV的病毒引起。可以通过与具有HPV的人进行性接触而感染HPV。HPV病毒有很多类型。并非所有类型的HPV都会导致宫颈癌。其中一些会导致生殖器疣，但其他类型可能不会导致任何症状。大多数成人都在某个时候感染了HPV。感染可能会自行消失。但有时它可能会导致生殖器疣或导致宫颈癌。

美国癌症协会对美国2015年宫颈癌的估计为：将有大约12,900个新的浸润性宫颈癌病例被诊断。约有4，100名女性将死于宫颈癌。此外，全球每年有528,000例宫颈癌新病例报告，估计有266,000例相关死亡。在持续性/复发性转移性鳞状宫颈癌(PRmCC)中，生存率低于30％，在历史上这一比率在12个月生存期内从未被超过。采用一线最佳铂类双重化疗+/-贝伐单抗，中位生存期为13-17个月。然而，在至少一条治疗线的全身治疗后进展的患者只能生存4-7个月。

此外，一线治疗失败后还没有经过批准的疗法。因此，宫颈癌(包括PRmCC)需要新的治疗模式。

本发明通过提供用于治疗宫颈癌的减毒活李斯特菌疫苗载体而满足这一需求。本发明进一步提供用于治疗宫颈癌的包含减毒活李斯特菌的联合疗法。

发明内容