[发明专利]用于检测肝脏纤维化和对疗法的响应性的方法

权利要求书

1.用于确定hsa-miR-582-3p和hsa-miR-22-3p的表达水平的探针和/或引物在制备用于确定患有乙型肝炎病毒（HBV）诱导的肝纤维化的对象是否更可能对治疗乙型肝炎病毒（HBV）诱导的肝纤维化的抗病毒药物响应的试剂中的应用，其中在从所述对象的体液中分离的外泌体的样品中，与对照相比，hsa-miR-582-3p和hsa-miR-22-3p的至少两倍的差异表达，表明所述对象更可能对所述抗病毒药物响应。

2.根据权利要求1所述的应用，其中与对照相比，如下任一项所述的hsa-miR-582-3p和hsa-miR-22-3p的差异表达，表明所述对象更可能对所述抗病毒药物响应：

（a）至少2.5倍的差异表达；（b）至少3倍的差异表达；（c）至少3.5倍的差异表达；（d）至少4.5倍的差异表达；（e）至少5倍的差异表达；（f）至少6倍的差异表达；（g）至少7倍的差异表达；（h）至少8倍的差异表达；（i）至少9倍的差异表达；（j）至少10倍的差异表达；（k）至少11倍的差异表达；（l）至少12倍的差异表达；（m）至少13倍的差异表达；（n）至少14倍的差异表达；或（o）至少15倍的差异表达。

3.根据权利要求1所述的应用，其中所述对象患有乙型肝炎病毒（HBV）诱导的肝硬化。

4.根据权利要求1所述的应用，其中所述抗病毒药物选自干扰素α、聚乙二醇化干扰素、拉米夫定、阿德福韦酯、恩替卡韦、替比夫定和替诺福韦。

5.根据权利要求1所述的应用，其中所述对象是人类。

6.根据权利要求1所述的应用，其中所述对象感染有乙型肝炎病毒。

7.根据权利要求1至4中任一项所述的应用，其中所述体液包括血液、尿液、唾液、母乳和淋巴液的一种或多种。

8.根据权利要求1至4中任一项所述的应用，其中所述体液包括血清或血浆。

9.根据权利要求7所述的应用，其中所述体液包含尿液。

10.根据权利要求1至4中任一项所述的应用，其中所述外泌体的平均直径为10至250nm。

11.根据权利要求1至4中任一项所述的应用，其中所述外泌体是通过超速离心进行分离的。

12.根据权利要求1至4中任一项所述的应用，其中所述外泌体是使用外泌体表面标记物从生物学样品中分离的。

13.根据权利要求1至4中任一项所述的应用，其中所述外泌体被保留在捕获表面上，所述捕获表面足以将外泌体部分保留在所述捕获表面上或其中。

14.根据权利要求13所述的应用，其中所述捕获表面是带正电的。

15.根据权利要求14所述的应用，其中所述捕获表面是包含再生纤维素或季铵盐的膜。

16.根据权利要求1至4中任一项所述的应用，其中所述外泌体是使用外泌体特异性的抗体进行分离的。

17. 根据权利要求16所述的应用，其中所述抗体特异性地结合至Rab 5b、 HSPA8、CD9、GAPDH、ACTB、CD63、CD81、ANXA2、ENO1、HSP90AA1、 EEF1A1、PKM2、YWHAE、SDCBP、PDCD61P、ALB、YWHAZ、EEF2、ACTG1、LDHA、HSP90AB1、ALDOA、MSN、ANXA5、PGK1或CFL1。