[发明专利]质谱法检测淀粉状蛋白β

权利要求书

1.用于测定样品中淀粉状蛋白β的量的方法，所述方法包括：

(a)纯化所述样品中的淀粉状蛋白β；

(b)电离所述样品中的淀粉状蛋白β以产生淀粉状蛋白β的先驱离子；

(c)生成淀粉状蛋白β的一种或多种碎片离子；和

(d)通过质谱法测定来自步骤(c)或(d)或二者的所述离子(一种或多种)的量；其中所述淀粉状蛋白β离子(一种或多种)的量与所述样品中淀粉状蛋白β的量相关。

2.权利要求1所述的方法，其中所述纯化包括液相色谱法。

3.权利要求2所述的方法，其中所述液相色谱法包括高效液相色谱法(HPLC)。

4.权利要求1所述的方法，其中所述方法进一步包括C-4分析柱。

5.权利要求1所述的方法，进一步包括使用防止淀粉状蛋白β粘附至表面的试剂预处理与所述样品接触的器材的所述表面。

6.权利要求5所述的方法，其中所述试剂是大肠杆菌溶胞产物。

7.权利要求1所述的方法，进一步包括使用稳定淀粉状蛋白β的试剂培育所述样品。

8.权利要求7所述的方法，其中所述试剂包括结合至淀粉状蛋白β的C-端的抗体、结合至淀粉状蛋白β的N-端的抗体、载脂蛋白E2、载脂蛋白E4、或其组合。

9.权利要求7所述的方法，其中所述试剂给予通过至少三个冻融循环的稳定性。

10.权利要求7所述的方法，其中所述试剂给予-70℃下至少2个月的稳定性。

11.权利要求1所述的方法，其中所述方法包括混合模式阴离子交换提取。

12.权利要求1所述的方法，其中所述电离包括加热电喷雾电离(HESI)。

13.权利要求1所述的方法，其中所述电离包括以正模式进行电离。

14.权利要求1所述的方法，其中所述生成碎片离子包括使用20V至45V之间的碰撞能量。

15.权利要求1所述的方法，其中所述淀粉状蛋白β包括具有序列DAEFRHDSGYEVHHQKLVFFAEDVGSNKGAIIGLMVGGVV(SEQ ID NO:1)的Aβ40或具有序列DAEFRHDSGYEVHHQKLVFFAEDVGSNKGAIIGLMVGGVVIA(SEQ ID NO:3)的Aβ42。

16.权利要求1所述的方法，进一步包括添加内标。

17.权利要求16所述的方法，其中所述内标是同位素标记的。

18.权利要求17所述的方法，其中所述内标包括¹³C¹⁵N标记。

19.权利要求1所述的方法，其中所述方法的定量限小于或等于10ng/mL。

20.权利要求1所述的方法，其中所述样品是脑脊液(CSF)。