[发明专利]质谱法检测淀粉状蛋白β

说明书

提供了用于检测或定量淀粉状蛋白β的方法。在具体的方面，本文提供了通过质谱法检测淀粉状蛋白β或其片段的方法。在另一方面，本文提供了用于测定淀粉状蛋白β42(Aβ42)与淀粉状蛋白β40(Aβ40)的比率的方法。在另一方面，本文提供了用于诊断或预后阿耳茨海默病或痴呆的方法。

相关专利申请的交叉引用

本申请要求2015年9月28日提交的美国临时申请号62/234,027和2016年1月12日提交的美国临时申请号62/277,772的权益，其每个通过引用以其全部并入本文。

技术领域

本发明涉及淀粉状蛋白β的检测或定量。在具体的方面，本发明涉及通过质谱法检测淀粉状蛋白β或其片段的方法。

背景技术

阿耳茨海默病是影响老年人群的最常见形式的痴呆。阿耳茨海默病的特征在于认知能力，具体而言，记忆和学习的进行性衰退。该疾病的标志之一是由淀粉状蛋白β(Aβ或Abeta)肽组成的神经炎性斑块。

当前的预测或诊断阿耳茨海默病的临床诊断方法的准确度和灵敏度低。当前提供免疫试验以检测淀粉状蛋白β，其是预测进展至阿耳茨海默病的生物标志物。然而，值得关注的是使用当前可用的免疫试验观察到的结果中的实验室间变化。

需要用于检测淀粉状蛋白β的准确的和灵敏的试验。

发明内容

本文提供了通过质谱法——包括串联质谱法——检测或测定样品中淀粉状蛋白β(Aβ)的量的方法。

在某些实施方式中，本文提供的用于测定淀粉状蛋白β的量的方法包括(a)纯化样品中的淀粉状蛋白β；(b)电离样品中的淀粉状蛋白β；和(c)通过质谱法测定淀粉状蛋白β离子(一种或多种)的量；其中淀粉状蛋白β离子(一种或多种)的量与样品中淀粉状蛋白β的量相关。

在某些实施方式中，本文提供的用于测定淀粉状蛋白β的量的方法包括(a)纯化样品中的淀粉状蛋白β；(b)电离样品中的淀粉状蛋白β以产生淀粉状蛋白β的先驱离子；(c)生成淀粉状蛋白β的一种或多种碎片离子；和(d)通过质谱法测定来自步骤(c)或(d)或二者的离子(一种或多种)的量；其中淀粉状蛋白β离子(一种或多种)的量与样品中淀粉状蛋白β的量相关。

在某些实施方式中，本文提供的用于测定淀粉状蛋白β的量的方法包括(a)消化样品中的淀粉状蛋白β以生成淀粉状蛋白β的一种或多种片段；(b)纯化一种或多种淀粉状蛋白β片段；(c)电离一种或多种淀粉状蛋白β片段以产生先驱离子；(d)生成一种或多种碎片离子；和(e)通过质谱法测定来自步骤(c)或(d)或二者的离子(一种或多种)的量；其中离子(一种多种)的量与样品中淀粉状蛋白β片段(一种多种)的量相关。

在某些实施方式中，本文提供了用于测定淀粉状蛋白β42(Aβ42)的量的方法。在一些实施方式中，Aβ42片段包括序列GAIIGLMVGGVVIA(SEQ ID NO:4)。在一些实施方式中，方法包括(a)消化样品中的淀粉状蛋白β以生成淀粉状蛋白β42(Aβ42)；(b)纯化Aβ42；(c)电离Aβ42以产生先驱离子；(d)生成Aβ42的一种或多种碎片离子；和(e)通过质谱法测定来自步骤(c)或(d)或二者的离子(一种或多种)的量；其中离子(一种多种)的量与样品中Aβ42的量相关。

在某些实施方式中，本文提供了用于测定淀粉状蛋白β40(Aβ40)的量的方法。在一些实施方式中，Aβ40片段包括序列GAIIGLMVGGVV(SEQ ID NO:2)。在一些实施方式中，方法包括(a)消化样品中的淀粉状蛋白β以生成淀粉状蛋白β40(Aβ40)；(b)纯化Aβ40；(c)电离Aβ40以产生先驱离子；(d)生成Aβ40的一种或多种碎片离子；和(e)通过质谱法测定来自步骤(c)或(d)或二者的离子(一种或多种)的量；其中离子(一种多种)的量与样品中Aβ40的量相关。