[发明专利]用于检测单核苷酸多态性的试剂盒和方法

权利要求书

1.用于检测单核苷酸多态性的试剂盒，其包含：

i）单核苷酸多态性特异性正向引物，其包含：在PCR条件下不与靶核酸杂交的5'端标签寡核苷酸；以及单核苷酸多态性特异性寡核苷酸，其能够与所述靶核酸特异性杂交，并且在其3'端具有对于所述单核苷酸多态性的等位基因有特异性的核苷酸；

ii）用于扩增所述靶核酸的反向引物；以及

iii）延伸引物，其包含：在PCR条件下不与所述靶核酸、所述单核苷酸多态性特异性正向引物和所述反向引物中的任一个杂交的延伸多核苷酸，其中所述延伸多核苷酸被提供成通过引物延伸反应来延伸PCR产物的长度；以及所述标签寡核苷酸；并且

其中所述延伸多核苷酸的长度为20至200 nt。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其还包含iv）包含选自所述延伸多核苷酸的核酸序列的延伸产物-扩增正向引物。

3.根据权利要求1所述的试剂盒，其中所述单核苷酸多态性是野生型或突变体。

4.用于检测单核苷酸多态性的试剂盒，其包含：

i）单核苷酸多态性第一等位基因特异性正向引物，其包含：在PCR条件下不与靶核酸杂交的5'端第一标签寡核苷酸；以及单核苷酸多态性第一等位基因特异性寡核苷酸，其能够与所述靶核酸特异性杂交，并且在其3'端具有对于所述单核苷酸多态性的所述第一等位基因有特异性的核苷酸；

ii）单核苷酸多态性第二等位基因特异性正向引物，其包含：在PCR条件下不与所述靶核酸和所述第一标签寡核苷酸杂交的5'端第二标签寡核苷酸；以及单核苷酸多态性第二等位基因特异性寡核苷酸，其能够与所述靶核酸特异性杂交，并且在其3'端具有对于所述单核苷酸多态性的所述第二等位基因有特异性的核苷酸；

iii）用于扩增所述靶核酸的通用反向引物；以及

iv）延伸引物，其包含：在PCR条件下不与所述靶核酸、所述单核苷酸多态性第一等位基因特异性正向引物、所述单核苷酸多态性第二等位基因特异性正向引物和所述反向引物中的任一个杂交的延伸多核苷酸，其中所述延伸多核苷酸被提供成通过引物延伸反应来延伸PCR产物的长度；以及包含a）所述第一标签寡核苷酸和b）所述第二标签寡核苷酸中的任一者的标签寡核苷酸；并且

其中所述延伸多核苷酸的长度为20至200 nt。

5.根据权利要求4所述的试剂盒，其还包含含有选自所述延伸多核苷酸的核酸序列的延伸产物-扩增正向引物。

6.根据权利要求4所述的试剂盒，其中所述第一等位基因是野生型，并且所述第二等位基因是突变体。