[发明专利]含有氯毒素域的嵌合抗原受体

说明书

描述了嵌合跨膜免疫受体(CAR)，其包括结合人胶质瘤或其它人肿瘤细胞的包括氯毒素或相关毒素，或氯毒素或相关毒素的变体的胞外域、跨膜区、共刺激域和胞内信号传导域。

发明背景

已经研究了基于肿瘤特异性T细胞的免疫疗法，包括使用工程化改造的T细胞的疗法用于抗肿瘤治疗。嵌合抗原受体(CAR)由胞外肿瘤识别/靶向域，胞外接头/间隔物，跨膜域，和胞内T细胞活化和共刺激信号传导域组成。识别/靶向域的设计对于避免不利的脱靶效应是关键的。大多数CAR肿瘤靶向域是衍生自抗体序列的单链可变片段(scFv)，其利用抗体对特定抗原结合的特异性。也有衍生自正常受体配体的CAR肿瘤靶向域的实例，例如靶向表达IL-13受体IL-13Rα2的细胞的IL-13细胞因子CAR。尽管取得了一些显著的成功，但鉴定和验证新的CAR肿瘤靶向域仍然是本领域的主要挑战。

恶性神经胶质瘤(malignant gliomas，MG)，其包括多形性成胶质细胞瘤(AA-WHOIII级)和成胶质细胞瘤(GBM-WHO IV级)，在美国每年具有大概20,000例诊断的新病例的发生率。根据美国脑肿瘤协会(American Brain Tumor Association)，基于美国2010人口普查数据，患有恶性脑肿瘤的存活个体的总体患病率粗略地为140,000人。尽管MG是罕见的疾病，但是在其恶性行为方面其为高度攻击性并且是异质的，并几乎一律致命。目前用于高级MG的护理标准疗法仅产生短期益处，并且这些脑肿瘤事实上是不能治愈的。的确，即使利用现代手术和放射治疗技术(其经常加剧通过定位于中枢神经系统(CNS)强加的早已严重的发病率)，5年的存活率也是非常低的。此外，对于复发疾病的大多数患者，存在很少的治疗选择。因此，明显需要更有效的疗法，特别用于已经在一线疗法后复发/进展的那些患者。

利用表达嵌合抗原受体(CAR)的工程化改造的T细胞的过继性T细胞疗法(ACT)可以提供安全且有效的方式来减少MG的复发率，因为CAR T细胞可以被工程化改造以特异识别抗原性独特的肿瘤群体(Cartellieri et al.2010J Biomed Biotechnol 2010:956304；Ahmed et al.2010Clin Cancer Res 16:474；Sampson et al.2014Clin Cancer Res 20:972；Brown et al.2013Clin Cancer Res 2012 18:2199；Chow et al.2013Mol Ther 21:629)，并且T细胞可以通过脑实质迁移以靶向并杀死浸润性恶性细胞(Hong etal.2010Clin Cancer Res 16:4892；Brown et al.2007J Immunol 179:3332；Hong etal.2010Clin Cancer Res16:4892；Yaghoubi 2009Nat Clin Pract Oncol 6:53)。

发明概述