[发明专利]从血液样本中分离靶细胞的方法及其用途

权利要求书

1.一种从血液样本中分离靶细胞的方法，所述血液样本来自于孕妇，其特征在于，所述靶细胞为胎儿细胞，所述靶细胞呈单细胞形式，所述方法包括：

（1）将血液样本进行免疫磁珠分选，以便获得含有所述靶细胞的第一分选产物，所述免疫磁珠分选采用携带抗体的磁珠，其中，所述抗体针对选自CD45、CD14、CD56、CD19和CD20的至少一种；

（2）使用抗体将所述第一分选产物进行流式细胞分选，以便获得含有所述靶细胞的第二分选产物，其中，所述流式细胞分选使用抗体对所述第一分选产物进行表面抗原染色，所述表面抗原包括选自CD45、CD14、CD56、CD19和CD20的至少一种，所述第二分选产物为Hoechst阳性、PI阴性和所述表面抗原阴性的细胞；以及

（3）采用口吸管法分离所述第二分选产物，将所述第二分选产物平铺于载玻片表面，挑取明场下有完整细胞形貌以及依据染色所选择的表面抗原的耦合染料来确定荧光场下符合条件的单细胞，以便获得呈单细胞形式的所述靶细胞；

其中，所述抗体为靶细胞非特异性的阴性抗体。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤（1）之前，进一步包括：除去所述血液样本中的红细胞。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，在存在抗凝血剂的条件下，使所述血液样本与红细胞裂解液接触，以便除去所述血液样本中的所述红细胞。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述抗凝血剂为选自肝素、乙二胺四乙酸、枸橼酸盐、草酸盐和ACD抗凝剂的至少一种。

5.一种用于从血液样本中分离靶细胞的装置，所述血液样本来自于孕妇，其特征在于，所述靶细胞为胎儿细胞，所述靶细胞呈单细胞形式，所述装置包括：

免疫磁珠分选单元，所述免疫磁珠分选单元用于将所述血液样本进行免疫磁珠分选，以便获得含有所述靶细胞的第一分选产物，所述免疫磁珠分选采用携带抗体的磁珠，其中，所述抗体针对选自CD45、CD14、CD56、CD19和CD20的至少一种；

流式细胞分选单元，所述流式细胞分选单元与所述免疫磁珠分选单元相连，用于使用抗体将所述第一分选产物进行流式细胞分选，以便获得含有所述靶细胞的第二分选产物，所述流式细胞分选单元被配置为通过下列步骤进行所述流式细胞分选：使用抗体对所述第一分选产物进行表面抗原染色，所述表面抗原包括选自CD45、CD14、CD56、CD19和CD20的至少一种，所述第二分选产物为Hoechst阳性、PI阴性和所述表面抗原阴性的细胞；以及

口吸管法分离单元，所述口吸管法分离单元与所述流式细胞分选单元相连，用于将所述第二分选产物进行口吸管分离，以便获得呈单细胞形式的所述靶细胞，所述口吸管法分离单元被配置为通过下列步骤进行所述口吸管法分离：将所述第二分选产物平铺于载玻片表面，挑取明场下有完整细胞形貌以及依据染色所选择的表面抗原的耦合染料来确定荧光场下符合条件的单细胞；

其中，所述抗体为靶细胞非特异性的阴性抗体。

6.根据权利要求5所述的装置，其特征在于，进一步包括：红细胞去除单元，所述红细胞去除单元用于除去所述血液样本中的红细胞。

7.根据权利要求6所述的装置，其特征在于，所述红细胞去除单元被配置为通过下列步骤除去所述血液样本中的所述红细胞：

在存在抗凝血剂的条件下，使所述血液样本与红细胞裂解液接触，以便除去所述血液样本中的所述红细胞。

8.根据权利要求7所述的装置，其特征在于，所述抗凝血剂为选自肝素、乙二胺四乙酸、枸橼酸盐、草酸盐和ACD抗凝剂的至少一种。

9.一种对血液样本中靶细胞进行基因组扩增的方法，其特征在于，包括：

按照权利要求1~4中任一项所述的方法，从所述血液样本中分离靶细胞，所述靶细胞呈单细胞的形式；

对所述靶细胞进行裂解处理，以便得到裂解液，所述裂解液含有所述靶细胞的全基因组；以及

采用聚合酶对所述靶细胞的全基因组进行扩增。