[发明专利]双脱水半乳糖醇和其衍生物或类似物的制剂的分析和分辨方法

说明书

一种用于分析双脱水半乳糖醇制剂的改进的分析方法，提供用于测定双脱水半乳糖醇的纯度并检测双脱水半乳糖醇制剂中的杂质以及鉴别任何此类杂质的方法。所述方法采用高效液相色谱HPLC，尤其采用具有ELSD检测的逆相酰胺色谱柱的HPLC；所述HPLC可以接着串联质谱。所述方法可另外包括进行双脱水半乳糖醇制剂中存在的至少一种特定物质峰的制备型HPLC采集的步骤。

相关申请的交叉引用

本申请案主张于2015年11月25日由Q.Xu提交的题为“双脱水半乳糖醇和其衍生物或类似物的制剂的分析和分辨方法(Methods for Analysis and Resolution ofPreparations of Dianhydrogalactitol and Derivatives or Analogs Thereof)”的第62/260,019号美国临时专利的权益，其内容通过全文引用并入本文中。

技术领域

本发明涉及改进的双脱水半乳糖醇和其衍生物或类似物的制剂的分析方法，尤其涉及高效液相色谱法(high performance liquid chromatography，HPLC)。

背景技术

双脱水半乳糖醇(1,2:5,6双脱水半乳糖醇或DAG)是多种己糖醇或己糖醇衍生物中的一个，具有显著药理学活性，包含化学治疗活性。特定来说，已提议双脱水半乳糖醇用于化学疗法，如在授予纳尔逊(Nielsen)等人的第7,157,079号美国专利中，所述专利通过引用并入本文中。

双脱水半乳糖醇具有抗多种肿瘤的活性。然而，双脱水半乳糖醇要想成功地作为治疗剂使用，它必须要有极高的纯度且要除去杂质。杂质的存在会引起不合期望的副作用。多年前出现一个实例，当一批氨基酸色氨酸，蛋白质的正常组分，中存在杂质时，导致嗜酸粒细胞性肌痛综合症显著爆发，引起大量永久性残疾病例和至少37例死亡。如果治疗剂，如双脱水半乳糖醇，要用于具有受损免疫系统或肝或肾功能障碍的患者或用于老年患者时，这一点尤其重要。此类患者由于其对污染物的敏感，可能经历不合期望的副作用的发生率更高。

在双脱水半乳糖醇制剂中发现的一种杂质是半乳糖醇。双脱水半乳糖醇制剂中还存在其它杂质，视其制备方法而定。

因此，需要改进的检测双脱水半乳糖醇制剂中的杂质和降解产物的分析方法，以提供当双脱水半乳糖醇出于治疗性目的给药时不大可能引起副作用的更高纯度的制剂。

发明内容

本文中描述一种改进的测定双脱水半乳糖醇和其衍生物或类似物的纯度且检测符合此等需要的双脱水半乳糖醇和其衍生物或类似物的制剂中的杂质和降解产物的分析方法。特定来说，分析方法适用于测定双脱水半乳糖醇的纯度且检测双脱水半乳糖醇制剂中的杂质和降解产物。

一般而言，此分析方法利用高效液相色谱法(HPLC)，尤其具有蒸发光散射检测(evaporative light scattering detection，ELSD)的HPLC。

特定来说，根据本发明的分析方法能够检测双脱水半乳糖醇制剂中的杂质半乳糖醇和二溴半乳糖醇。

本发明的一个方面是用于分析双脱水半乳糖醇制剂中存在的杂质的存在和量的分析方法，包括以下步骤：

(1)通过将双脱水半乳糖醇制剂进行高效液相色谱来分析所述制剂，使用采用呈亲水性相互作用模式的酰胺化学物质和乙烯桥连混合(ethylene bridged hybrid，BEH)技术的逆相酰胺色谱柱，以第一流动相是100％乙腈且第二流动相是100％水的流动相梯度洗脱，以将双脱水半乳糖醇与半乳糖醇和制剂的其它污染物分离；以及

(2)测定通过高效液相色谱分辨的代表除双脱水半乳糖醇本身以外的化合物的一或多个峰的相对浓度。