[发明专利]无细胞DNA提取法用于非侵入性产前筛选的方法在审
| 申请号： | 201680076102.9 | 申请日： | 2016-10-25 |
| 公开（公告）号： | CN108431222A | 公开（公告）日： | 2018-08-21 |
| 发明（设计）人： | B·安德森;C·斯特罗姆;D·曹;Y·刘;W·孙 | 申请（专利权）人： | 奎斯特诊断投资股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12Q1/6806 |
| 代理公司： | 北京坤瑞律师事务所 11494 | 代理人： | 张平元 |
| 地址： | 美国特*** | 国省代码： | 美国;US |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 无细胞 非侵入性 筛选 胎儿非整倍性 液体生物样品 胎儿DNA 可用 分析 | ||
1.一种用于将无细胞DNA(cfDNA)从来自哺乳动物的液体生物样品分离的方法，所述方法包括：
a)使含有cfDNA的液体生物样品与多个可逆地结合DNA的磁性珠粒接触；
b)将cfDNA结合的磁性珠粒从所述液体生物样品的未结合组分分离；
c)将所述cfDNA结合的磁性珠粒转移到含有洗脱溶液的容器；
d)通过使含有在所述洗脱溶液中的所述磁性珠粒的容器与磁性平板接触将所述磁性珠粒从所述洗脱溶液分离和收集含有所述cfDNA的洗脱溶液。
2.权利要求1的方法，其中，所述磁性珠粒包含交联的聚苯乙烯。
3.权利要求1的方法，其中，所述磁性珠粒的表面包含可逆地结合DNA的一个或多个官能团。
4.权利要求1的方法，其中，所述磁性珠粒包被有含硅包衣。
5.权利要求1的方法，其中，通过将所述cfDNA结合的磁性珠粒从所述液体生物样品转移到另一个容器而将所述cfDNA结合的磁性珠粒从所述液体生物样品的未结合组分分离。
6.权利要求1的方法，其中，所述cfDNA结合的磁性珠粒从所述液体生物样品直接转移到含有所述洗脱溶液的容器。
7.权利要求1的方法，其中，将从所述液体生物样品转移的所述cfDNA结合的磁性珠粒转移到含有洗涤溶液的容器。
8.权利要求1的方法，其中，通过将棒状磁铁插入到所述液体生物样品中以磁性地结合所述cfDNA结合的磁性珠粒而将所述cfDNA结合的磁性珠粒从所述液体生物样品的未结合的组分分离。
9.权利要求8的方法，其中，使所述珠粒沉积在含有所述洗脱溶液的容器中。
10.权利要求8的方法，其中，使所述珠粒沉积在含有所述洗涤溶液的容器中。
11.权利要求10的方法，其中，通过将棒状磁铁插入到含有所述cfDNA结合的磁性珠粒的洗涤溶液中而将所述cfDNA结合的磁性珠粒转移到所述洗脱溶液，和使所述磁性地结合的珠粒沉积在含有所述洗脱溶液的容器中。
12.权利要求1的方法，其中，所述磁性珠粒的转移为自动的。
13.权利要求1的方法，其中，所述液体生物样品为血浆样品。
14.权利要求1的方法，其中，所述液体生物样品为从妊娠雌性获得的。
15.权利要求1的方法，其中，所述液体生物样品为从人类受试者获得的。
16.权利要求1的方法，其中，所述液体生物样品的体积为0.5-2mL。
17.权利要求1的方法，其中，所述洗脱溶液的体积小于200μl。
18.权利要求1的方法，其中，所述洗脱溶液的体积小于或约为150μl、小于或约为100μl、小于或约为90μl、小于或约为80μl、小于或约为70μl、小于或约为60μl、小于或约为50μl或者小于或约为40μl。
19.权利要求1的方法，其中，步骤(a)在多孔板中进行。
20.权利要求19的方法，其中，洗涤和洗脱步骤在相同大小的多孔板中进行。
21.权利要求20的方法，其中，所述多孔板为24孔深孔板。
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