[发明专利]用于生产酵母提取物的方法

说明书

一种用于生产酵母提取物的方法，该方法包括以下步骤：a)向包含蛋白质的酵母中添加酶组合物；b)孵育以便水解该蛋白质，其中该酶组合物包含木瓜蛋白酶和第二蛋白酶。

技术领域

本发明涉及使用包含蛋白酶的酶组合物生产酵母提取物的方法。

序列表的引用

本申请含有计算机可读形式的序列表。将该计算机可读形式通过引用结合在此。

发明背景

酵母提取物被广泛地使用，例如，用于食品行业中的调味剂，用于微生物发酵培养基，并且用作保健食品。所述的酵母提取物的生产被描述于文献中，参见例如，Kelly,M.(1982)，Yeast Extract[酵母提取物](在：Industrial Enzymology[工业酶学]中，Godfrey,T.编著)或Chae,H.J.等人，(2001),Bioresource Technology[生物资源技术]76,253-258。它典型地是通过以下步骤制造的：通过酸水解或机械或化学破坏细胞分解酵母，然后通过用内源性酶自溶降来解酵母的大分子结构，尤其是蛋白，为可溶性材料的最大量。可能地，添加外源酶，包括蛋白酶，如木瓜蛋白酶，来增进酵母自身酶的作用。在酶水解之后，将酵母提取物自细胞碎片分离并且可能进行巴氏消毒并且浓缩。

GB 2075054 A披露了一种用于生产酵母提取物的方法，其中木瓜蛋白酶用作蛋白水解酶。WO 2008/077890披露了一种使用衍生自拟诺卡氏菌属物种(Nocardiopsis sp.)NRRL 18262的蛋白酶生产酵母提取物的方法。但仍然希望生产具有高提取物产量的酵母提取物。

发明内容

本发明的目的是提供一种生产酵母提取物及其酶组合物的改进方法。发明人惊奇地发现使用包含木瓜蛋白酶和第二蛋白酶的酶组合物可以实现同基因效应，例如，这种酶组合物可用于有效提高酵母提取物的产量，同时，本发明制备的酵母提取物的浊度和味道与仅用木瓜蛋白酶作为外源蛋白酶制备的酵母提取物几乎相同。

在一方面，本发明涉及用于生产酵母提取物的方法，该方法包括：

a)向包含蛋白质的酵母中添加酶组合物；和

b)进行孵育以便水解该蛋白质，

其中该酶组合物包含木瓜蛋白酶和第二蛋白酶，并且该第二蛋白酶选自由以下组成的组：

(i)多肽，该多肽包含本文中的SEQ ID NO:1的氨基酸1-177或WO2003/048353中的SEQ ID NO:2的氨基酸1-177，或由其组成；

(ii)多肽，该多肽包含与本文中的SEQ ID NO:1的氨基酸1-177或WO2003/048353中的SEQ ID NO:2的氨基酸1-177具有至少80％，更优选至少85％，更优选至少90％，更优选至少91％，更优选至少92％，甚至更优选至少93％，最优选至少94％，并且甚至最优选至少95％，例如甚至至少96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列，或由其组成；

(iii)变体，该变体包含本文中的SEQ ID NO:1的氨基酸1-177或WO2003/048353中的SEQ ID NO:2的氨基酸1-177的一个或多个(例如，若干个)氨基酸的取代、缺失、和/或插入；和

(iv)具有蛋白酶活性的(i)、(ii)或(iii)的多肽的片段。

在优选的实施例中，该第二蛋白酶衍生自热子囊菌属(Thermoascus)，优选地衍生自嗜热子囊菌(Thermoascus aurantiacus)，最优选地衍生自嗜热子囊菌CGMCC编号0670。