[发明专利]用于生产毛囊和新生乳头的方法及其用于体外测试和体内植入物的用途在审
| 申请号： | 201680078151.6 | 申请日： | 2016-11-14 |
| 公开（公告）号： | CN108473951A | 公开（公告）日： | 2018-08-31 |
| 发明（设计）人： | 格尔德·林德纳 | 申请（专利权）人： | 柏林工业大学 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 深圳市博锐专利事务所 44275 | 代理人： | 张明 |
| 地址： | 德国柏林*** | 国省代码： | 德国;DE |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 毛囊 成纤维细胞 新生乳头 真皮乳头 细胞培养条件 结缔组织鞘 体内植入物 球状细胞 体外测试 聚集体 粘附的 生产 | ||
1.一种用于生产新生乳头的方法，包括以下步骤：
a)提供来自至少一个毛囊的至少一个真皮乳头(DP)的分离的真皮乳头成纤维细胞(DPF)；
b)提供来自至少一个毛囊的分离的结缔组织鞘成纤维细胞(CTSF)；以及
c)在基本上非粘附的细胞培养条件下将所述DPF与所述CTSF共培养以形成球状细胞聚集体。
2.根据权利要求1所述的方法，其中，将所述DPF和所述CTSF以1-20：1-20的比例共培养。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其中，在步骤c)中的所述共培养期间另外存在内皮细胞(EC)和/或间质血管碎片(SVF)的细胞。
4.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，所述新生乳头由2个至20000个细胞、优选为10个至15000个、特别优选为1000个至10000个、非常特别地优选为1500个至5000个细胞组成。
5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，所述新生乳头被细胞外基质蛋白包被。
6.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，所述共培养在转动、旋转或摇动搅动下进行。
7.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，所述共培养进行至少10分钟，优选进行20分钟至48小时。
8.一种使用根据权利要求1至7中任一项所述的方法生产的新生乳头。
9.一种用于生产毛囊的方法，包括以下步骤：
a)提供至少一个使用根据权利要求1至7中任一项所述的方法生产的新生乳头；
b)提供选自角蛋白细胞(KC)、黑素细胞(MC)或结缔组织鞘成纤维细胞(CTSF)的至少一种另外的细胞群；以及
c)在基本上非粘附的细胞培养条件下，将所述新生乳头与所述至少一种另外的细胞群共培养。
10.根据权利要求9所述的方法，其中，将所述新生乳头与KC、MC和/或CTSF以1-10:1-50的比例共培养。
11.根据权利要求9或10所述的方法，其中，所述至少一种另外的细胞群能够从毛囊获得和/或是从毛囊获得的。
12.根据权利要求9至11中任一项所述的方法，其中，所述共培养进行至少10分钟，优选进行20分钟至48小时。
13.一种使用根据权利要求8至12中任一项所述的方法生产的毛囊。
14.一种皮肤等同物，包含根据权利要求8所述的新生乳头和/或根据权利要求13所述的毛囊。
15.一种移植物，包含有效量的根据权利要求14所述的皮肤等同物以及可选的可药用佐剂。
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