[发明专利]用于生产毛囊和新生乳头的方法及其用于体外测试和体内植入物的用途

说明书

本发明描述了一种用于生产新生乳头的方法，所述方法包括以下步骤：a)提供来自至少一个毛囊的至少一个真皮乳头(DP)的分离的真皮乳头成纤维细胞(DPF)，b)提供来自至少一个毛囊的分离的结缔组织鞘成纤维细胞(CTSF)；以及c)在基本上非粘附的细胞培养条件下将所述DPF与所述CTSF共培养以形成球状细胞聚集体。

背景技术

遗传决定的脱发，也称为雄激素性秃发，是一种非常普遍的临床现象，伴有心理和情绪影响，并对我们社会中受影响者的日常生活产生相当大的影响。遗传决定的脱发被认为是由毛囊对类固醇激素二氢睾酮的超敏反应引起的。

除了雄激素性秃发的药物治疗外，另一种选择是毛发移植，迄今为止，其仍然提供了最佳的美容效果。移植涉及将完整的雄激素不敏感毛囊从枕颈区或侧颞区重新分布至秃头的冠部或额区。

虽然现代毛发移植技术正变得越来越高级和有效，但是自然地，特别是在脱发进展显著的情况下，没有足够的供体毛发能够获得足够的、美容上显著的毛发密度并从而获得令人满意的治疗结果。进行毛发移植需要合适的毛发移植物或细胞作为用于受体上的材料。对必要的细胞进行增殖通常需要数周。此外，增殖必须在清洁室条件下进行，这意味着将所述产品归类为ATMP(高级治疗药物产品)，其不得不克服极高的开发和市场准入障碍。

发明内容

本发明的目的是减少或避免现有技术的一个或多个缺点。特别地，本发明的一个目的是提供一种可以生产新生乳头和毛囊的方法。

本发明通过提供用于生产新生乳头的方法来实现该目的，所述方法包括以下步骤：a)提供来自至少一个毛囊的至少一个真皮乳头(DP)的分离的真皮乳头成纤维细胞(DPF)；b)提供来自至少一个毛囊的分离的结缔组织鞘成纤维细胞(CTSF)；以及c)在基本上非粘附的细胞培养条件下将DPF与CTSF共培养以形成球状细胞聚集体。

出乎意料地发现，可以从至少DPF和CTSF的混合物中生产新生乳头。与现有技术中已知的用于增殖毛囊的方法相比，根据本发明的生产方法可以在更短的时间内进行。因此可以在一天内从毛囊获得细胞群，使用这些细胞产生更多数量的新生乳头和/或毛囊，并将这些新生成的新生乳头或毛囊植入无毛头皮中以进行治疗，从而在这些部位能够再次形成新的毛发。

除非上下文另外明确地指出，否则单数或复数形式的使用总是包括单数和复数两者。

根据本发明的方法涉及新生乳头的生产。同义地使用术语“新生乳头”、“新乳头”或“球体”，并且表示真皮乳头成纤维细胞(DPF)和结缔组织鞘成纤维细胞(CTSF)的基本上球状的细胞聚集体。因此，新生乳头包含至少DPF和CTSF的混合物。新生乳头由约2个至20000个细胞、优选10个至15000个、特别优选为500个至10000个、非常特别地优选为1000个至5000个细胞组成。新生乳头优选为毛囊分离后的毛囊的生理真皮乳头(DP)的至少一半大小。新生乳头同样优选地具有毛囊分离后的毛囊的生理DP的大致形状。

新生乳头可以包含含有一种或多种不同的细胞外基质蛋白例如胶原蛋白IV、纤连蛋白和/或层粘连蛋白的包被。该包被可以由DPF和CTSF自身在其形成新生乳头时产生。可替代地或另外地，还可以在新生乳头形成期间和/或形成之后通过向培养基中进一步添加一种或多种不同的细胞外基质蛋白来对新生乳头进行包被。

在体外进行本发明的生产方法。“体外”意指不位于活生物体(例如，人体或动物体)内的任何环境。因此，根据本发明的体外检测方法明确地不包括在人体或动物体上进行的方法。

在根据本发明的方法中，在第一方法步骤a)中提供来自至少一个真皮乳头(DP)的分离的真皮乳头成纤维细胞(DPF)，其中DP来源于至少一个毛囊。

可以由毛囊提供DP，并且从DP分离DPF，例如如下地进行：例如用一对镊子将分离的毛囊固定在毛干上，并且例如用另一对镊子将结缔组织鞘与毛干径向分离，从而翻转毛球，因此使DPF和具有毛发基质的毛干暴露。以这种方式，可以使DP与毛囊的剩余部分分离，这可以例如借助于针或插管来实现。