[发明专利]抗补体因子C1Q的FAB片段及其应用

说明书

本公开大体上涉及抗‑C1q抗体Fab片段及使用抗‑C1q抗体Fab片段的方法。

对相关申请的交叉引用

本申请要求于2015年11月24提交的美国临时申请序列号62/259,227的优先权权益，其特此通过引用被整体并入。

背景

急性或慢性炎症是许多临床紊乱的常见的组成部分，并且补体系统已经与越来越多的包含退行性疾病、癌症和移植排斥的炎性病况有关。补体系统充当病原体的感测器，识别病变的和受损的宿主细胞，并且与其他免疫系统和防御系统紧密地协作以消除潜在的危险。然而，不足的、过度的或控制不良的补体激活可以使健康和疾病之间的平衡倾斜，并且导致对宿主细胞的自我攻击。这样的免疫失衡可以刺激在补体、炎性细胞以及组织损伤之间的循环，所述循环再生炎性刺激因子而非消除它们和使临床并发症恶化。补体的不适当的激活已经与许多自身免疫疾病、炎性疾病和神经退行性疾病，以及缺血再灌注损伤和癌症联系起来。因此，补体活性的治疗性调控作为用于炎性过程的上游抑制的有吸引力的靶标出而现。

概述

本公开大体上针对抗-C1q的Fab片段及其应用。

补体是先天性免疫系统的主要组成部分，特别是因为其与炎症和身体对入侵生物体的防御相关。补体也涉及自身抗原和凋亡细胞的清除，形成向适应性免疫的桥梁，以及还在组织再生和肿瘤生长中发挥重要作用。为了实行这些功能，补体系统依赖于可溶性蛋白和细胞表面结合蛋白的相互作用，所述可溶性蛋白和细胞表面结合蛋白与病原体细胞表面相互作用以标记它们用于通过吞噬细胞的摧毁。补体系统由主要通过肝脏生产的大量不同的血浆蛋白组成。这些蛋白中的一些是一类被称为酶原的蛋白酶，所述蛋白酶自身通过蛋白水解裂解被激活。这些酶原可以广泛地分布而无需处于活性直到检测到局部病原体。因此，补体系统通过触发的酶级联反应被激活。

补体激活通过三个途径被引发：经典途径、旁路途径和凝集素途径。全部三个途径是基于通过模式识别蛋白的表面结构的检测。此外，全部三个途径通过共同的交集(补体C3)汇合。C3是急性期反应物。尽管少量也通过激活的单核细胞和巨噬细胞产生，但是肝脏是主要的合成位点。细胞内发现大约200kD的单链前体(pro-C3)；cDNA显示其包括1663个氨基酸。这是通过蛋白水解裂解被加工成α亚基和β亚基，在成熟蛋白质中，所述α亚基和所述β亚基通过二硫键连接。Pro-C3含有22个氨基酸残基的信号肽，β链(645个残基)和α链(992个残基)。2个链通过4个精氨酸残基(不存在于成熟蛋白质中)连接。

经典途径通过补体蛋白C1q与表面结合抗体(IgM和IgG)的斑的直接结合，以及与凋亡细胞或微生物细胞的表面上的C-反应性蛋白、血清淀粉样蛋白P、正五聚蛋白3和其他配体的结合被激活。

C1q是460kDa的大型多聚体蛋白，由18个多肽链(6个C1q A链，6个C1q B链和6个C1q C链)组成。C1r和C1s补体蛋白与C1q尾区结合以形成C1q复合物。C1q复合物与细胞的表面或与抗体Fc区的补体结合域的结合诱导C1q中的构象改变，所述构象改变导致C1r中的自催化酶活性的激活，然后其切割C1s以生成活性丝氨酸蛋白酶。一旦激活，C1s切割C4等，导致补体级联序列。最终该途径导致裂解和杀死感染的细胞的膜攻击复合物的形成。