[发明专利]具有EGFR配体的治疗性纳米颗粒及其制备和使用方法

说明书

本文部分提供治疗性纳米颗粒，其包括生物相容性聚合物；聚合物–EGFR配体缀合物，其中EGFR配体直接或经化学接头共价结合聚合物，以及治疗剂。

参考相关申请

本申请要求2016年2月10日提交的美国临时申请号62/293,609以及2016年8月1日提交的美国临时申请号62/369,590的优先权和权益，各申请通过引用全文纳入本文。

背景技术

向患者递送某些药物(如靶向具体组织或细胞类型或者靶向特定疾病组织但非正常组织)或控制药物释放的系统长期以来被认为是有益的。

例如，包括活性药物和靶向具体组织或细胞类型或者靶向特定疾病组织但非正常组织的疗法可减少非靶向身体组织中的药物量。当治疗诸如癌症等病症时，这尤其重要，所述病症中需要向癌细胞递送细胞毒性剂量的药物，而不杀死周围非癌组织。有效药物靶向可减少抗癌疗法中常见的不需要且有时是威胁生命的副作用。另外，这类疗法可允许药物到达某些除此疗法之外其无法到达的组织。提供受控释放和/或靶向治疗的疗法也必须能递送有效量的药物，这在其它纳米颗粒递送系统中是已知的限制。

例如，传统癌症治疗的主要限制是缺乏对癌细胞相比健康细胞的选择性。近期，大量研究致力于使用纳米药物以有效递送抗癌药剂给肿瘤。实体瘤依赖于大量营养物和氧气，引起血管生成过多，这进而导致内皮细胞间形成大缝隙。由此产生的渗漏血管系统导致肿瘤中尺寸依赖性如200–800nm的大分子和纳米颗粒积聚。尽管此被动靶向形式提供纳米药物相比游离药物的优势，但这不确保药物直接递送到或进入肿瘤细胞。

表皮生长因子受体(EGFR)是一个得到充分理解的靶标，其在多种癌中上调，与肿瘤增殖相关，一般被认为是用于纳米治疗靶向的有潜力受体。因此，需要靶向纳米颗粒疗法，如能靶向EGFR的纳米颗粒。

发明内容

本文描述聚合纳米颗粒，其包括治疗剂和靶向表皮生长因子受体的配体，以及制备和使用这类治疗性纳米颗粒的方法。在一些实施方案中，所设想的纳米颗粒可用于治疗癌症。

例如，本文提供包括以下的治疗性纳米颗粒：治疗剂；二嵌段聚乳酸-聚乙二醇共聚物或二嵌段聚乳酸-共-聚乙醇酸-聚乙二醇共聚物；和由以下表示的聚合缀合物：PLA-PEG-EGFR配体，其中EGFR配体与PEG直接或间接或经化学接头结合或关联，且其中PLA是聚乳酸和PEG是聚乙二醇。

本文还提供包含多种所设想的治疗性纳米颗粒的药学上可接受的组合物和在有需要的患者中治疗实体瘤癌症的方法，所述方法包括给患者施用治疗有效量的含预期治疗性纳米颗粒的组合物。

在另一方面，提供鉴定靶向配体-纳米颗粒缀合物的方法，包括1)提供叠氮化物功能化PLA-PEG纳米颗粒；2)使潜在的EGFR配体接触叠氮化物PLA-PEG纳米颗粒以形成靶向纳米颗粒；3)筛选靶向纳米颗粒的配体亲和性和/或纳米颗粒结合；4)调节潜在的EGFR配体；和5)重复步骤2-4以获得具有所需配体亲和性和/或结合的靶向纳米颗粒。

附图简要说明

图1是用于形成所公开的纳米颗粒的乳化过程的流程图。

图2A是所公开的乳化过程的流程图。

图2B是所公开的乳化过程的流程图。

图3A描述从市售可得的HO-PEG-叠氮化物合成聚合物组分PLA-PEG-叠氮化物，图3B描述合成聚合物PLA-Cy5荧光有效负载(payload)。

图4A-4B描述DBCO-胺与PLA-PEG-叠氮化物的缀合(图4A)，点击反应的液相色谱质谱(LCMS)分析证明与PLA-PEG-叠氮化物反应时消耗99％的DBCO胺(图4B)，点击反应的LCMS分析证明应用于叠氮化物纳米颗粒时消耗98％的DBCO胺(图4C)。