[发明专利]对降钙素基因相关肽特异性的新型蛋白

权利要求书

1.一种人嗜中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(hNGAL)突变蛋白，其中，所述突变蛋白能够以可检测的亲和力结合CGRP，其中，所述突变蛋白包含选自SEQ ID NOs:2-40和87-93的氨基酸序列。

2.根据权利要求1所述的hNGAL突变蛋白，其中，所述突变蛋白能够以5nM或更低的K_D结合CGRP。

3.根据权利要求1所述的hNGAL突变蛋白，其中，所述突变蛋白能够以5nM或更低的IC50值抑制或降低CGRP诱导的cAMP生成。

4.根据前述权利要求中任一项所述的hNGAL突变蛋白，其中，所述突变蛋白是与人CGRP和大鼠CGRP交叉反应性的。

5.根据权利要求4所述的hNGAL突变蛋白，其中，所述突变蛋白能够以可检测的亲和力结合大鼠CGRP。

6.根据权利要求4所述的hNGAL突变蛋白，其中，所述突变蛋白能够以5nM或更低的K_D结合大鼠CGRP。

7.根据权利要求1所述的hNGAL突变蛋白，其中，在竞争ELISA分析或基于表面等离子体共振的分析中测量对CGRP的结合亲和力。

8.根据权利要求3所述的hNGAL突变蛋白，其中，在基于SK-N-MC细胞或L6细胞的功能性分析中测量所述CGRP诱导的cAMP生成。

9.根据权利要求4所述的hNGAL突变蛋白，其中，所述突变蛋白是与人α-CGRP、人β-CGRP、大鼠α-CGRP和大鼠β-CGRP交叉反应性的。

10.根据权利要求1所述的hNGAL突变蛋白，其中，所述突变蛋白与选自有机分子、酶标记、放射性标记、着色标记、荧光标记、显色标记、发光标记、半抗原、地高辛、生物素、细胞抑制剂、毒素、金属复合物、金属和胶体金的化合物缀合。

11.根据权利要求1所述的hNGAL突变蛋白，其中，所述突变蛋白在其N-末端和/或其C-末端与融合配偶体融合，所述融合配偶体为蛋白质、蛋白质结构域或肽。

12.根据权利要求1所述的hNGAL突变蛋白，其中，所述突变蛋白与延长所述突变蛋白的血清半衰期的化合物缀合。

13.根据权利要求12所述的hNGAL突变蛋白，其中，所述延长血清半衰期的化合物选自聚亚烷基二醇分子、羟乙基淀粉、免疫球蛋白的Fc部分、免疫球蛋白的CH3结构域、免疫球蛋白的CH4结构域、白蛋白结合肽和白蛋白结合蛋白。

14.根据权利要求13所述的hNGAL突变蛋白，其中，所述聚亚烷基二醇是聚乙二醇(PEG)或其活化衍生物。

15.一种核酸分子，其包含编码前述权利要求中任一项所述的hNGAL突变蛋白的核苷酸序列。

16.根据权利要求15所述的核酸分子，其中，所述核酸分子与调控序列可操作地连接，以允许表达所述核酸分子。

17.根据权利要求15或16所述的核酸分子，其中，所述核酸分子包含在载体或噬菌粒载体中。

18.一种宿主细胞，其含有权利要求15至17中任一项所述的核酸分子。

19.一种生产权利要求1-14中任一项所述的hNGAL突变蛋白的方法，其中，所述突变蛋白是通过基因工程方法从编码所述突变蛋白的核酸开始产生的。