[发明专利]地加瑞克的制备方法及其中间体

说明书

本发明提供了制备肽、优选为十肽，例如地加瑞克(degarelix)的方法，所述方法通过优选地在逐步固相合成期间将对硝基‑苯丙氨酸并入到氨基酸序列中，并将它们转变成所需氨基酸Aph(Hor)和/或D‑Aph(Cbm)，优选地同时附连到固相支持物。本发明还提供了可用于所述制备方法的中间体。

技术领域

本发明涉及用于制备肽的合成过程或方法，其中所述肽中的至少一个氨基酸的特征在于是非天然的氨基苯丙氨酸衍生物，具体为Aph(Hor)或Aph(Cbm)。具体来说，本发明涉及十肽，例如地加瑞克，及其受保护的前体和其他有用中间体的合成。本发明还描述了在所述制备过程中有用的中间体。所述合成方法的特征在于使用对硝基-苯丙氨酸，所述对硝基-苯丙氨酸在最终肽序列中Aph(Hor)和/或D-Aph(Cbm)各自的相应位置处被并入到正在生长的肽链中。另一种合成方法是基于使用式II的化合物，所述式II的化合物本身使用对硝基-苯丙氨酸来合成。

背景技术

氨基酸序列中带有至少一个氨基-苯丙氨酸衍生物例如Aph(Hor)、Aph(Cbm)或Aph(Atz)的肽的合成，极具挑战性。所述合成通常产生具有大量杂质(例如缺失产物或副反应产物)的产物。

WO99/26964致力于解决合成azaline B的问题，所述azaline B是在5位和6位带有两个相同的非天然氨基酸Aph(Atz)的十肽。所述文献建议的合成始于中心“5/6”二肽片段的合成。这种方法的核心是同时掺入两个氨基三唑基团(Atz＝5'-(3'-氨基-1H-1',2',4'-三唑基))。首先，产生硝基取代的苯丙氨酸-苯丙氨酸二肽。然后将所述二肽上的硝基还原以获得氨基取代的二肽。然后通过首先将所述还原的二肽与氰亚胺代碳酸二苯酯反应然后再与肼反应，在所述氨基取代的苯丙氨酸基团上同时形成1,2,4-三唑基团。通过与适合的碱反应，然后将其与丢失的片段进行液相反应获得最终的“5/6”二肽片段。显然，这种简练的方法不适合于合成具有不同Aph侧链的十肽，例如地加瑞克。此外，它不能以固态肽合成方式来进行，而只能以液相合成方式进行。WO99/26964认为固态合成不适合于提供改进的地加瑞克的合成(第7页)。

高效地合成在第5位和第6位具有不同Aph衍生物的肽，仍然是具有挑战性的任务。

US5925730公开了具有GnRH拮抗特性并且可用于治疗的十肽的选择。所有这些拮抗剂都在第5-和/或第6-位具有Aph的衍生物。它们可用通用序列X-D-2Nal-(A)D-Phe-D-3Pal-Ser-Xaa5-Xaa6-Leu-Xaa8-Pro-Xaa10来表示，其中Xaa5是4Aph(Q1)或4Amf(Q1)，其中Q1是D-或L-Hor或D-或L-Imz，并且Xaa6是D-4Aph(Q2)或D-4Amf(Q2)，其中Q2是For、Ac、3-氨基-1,2,4-三唑或Q1。或者，当Xaa6含有Q且其中Q是或D-或L-Hor或D-或L-Imz时，Xaa5可以Ac、For或3-氨基-1,2,4-三唑作为Q1。

所述Aph衍生物可以在其侧链中含有氨甲酰基或包括脲的杂环，例如Ac-D-2Nal-D-4Cpa-D-3Pal-Ser-4Aph(氢乳清酸基)-D-4Aph(乙酰基)-Leu-Lys(异丙基)-Pro-D-Ala-NH2和Ac-D-2Nal-D-4Cpa-D-3Pal-Ser-4Aph(氢乳清酸基)-D-4Amf(Q2)-Leu-Lys(异丙基)-Pro-D-Ala-NH2，其中Q2是Cbm或MeCbm。这种肽最著名的例子是十肽地加瑞克。地加瑞克是一种被批准的药品。

下文公开了序列中带有Aph衍生物例如Aph(Hor)或Aph(Cbm)的肽的改进的合成方法，所述方法可以产生高得率和高纯度的产物，而无需投资特殊氨基酸例如Aph(Hor)或Aph(Cbm)的生产或采购。下文还公开了地加瑞克的合成方法。

化合物Ac-D-Nal-D-Cpa-D-Pal-Ser-Aph(Hor)-D-Aph(Cbm)-Leu-Lys(iPr)-Pro-D-Ala-NH₂，也被称为地加瑞克，由式(I)表示，其中的数字指示了对相关氨基酸位置进行计数的方向：