[发明专利]针对IL-17A、IL-17F和其他促炎性分子的三特异性抗体

说明书

本发明涉及生物技术领域，并且提供以高亲和力特异性结合人IL‑17A、人IL‑17F和人促炎性分子(特别是TNFα)的单克隆三特异性结合分子。本发明还涉及编码这样的结合分子的DNA构建体，相应的表达载体和生产方法，以及使用所述结合分子的治疗方法。

背景技术

免疫系统的主要功能是保护身体免受感染，诸如细菌或病毒，以及免于癌症病变。免疫应答包括炎症，即全身地或在身体的特定部位中免疫细胞的积累。免疫系统的细胞包括几种类型的骨髓和淋巴样细胞，诸如单核白细胞、巨噬细胞、树突细胞、嗜酸性粒细胞、T细胞、B细胞和嗜中性粒细胞。响应于感染或外来物质，免疫细胞分泌称为细胞因子的信号蛋白，其反过来调节免疫细胞的增殖、发育、分化和/或迁移。在某些情况下，免疫应答可导致病理过程，诸如自体免疫疾病(参见例如,Abbas等(eds.)(2000)Cellular andMolecular Immunology,W.B.Saunders Co.,Philadelphia,Pa.；Oppenheim和Feldmann(eds.)(2001)Cytokine Reference,Academic Press,San Diego,Calif.；von Andrian和Mackay,New Engl J Med343:1020-1034(2000)；Davidson和Diamond,New Engl J Med345:340-350(2001))。

CD4+Т细胞在免疫应答中发挥核心作用，帮助适应性或先天免疫系统的其他细胞。早期研究确定了两类CD4+Т细胞(Th1和Th2)。最近，已经确定了新的CD4+T细胞的亚群：Th17细胞。Th17细胞已成为适应性免疫系统的分支，专门用于加强保护宿主抵御细胞外细菌以及Th1和Th2细胞不提供保护的一些真菌和细菌。

已经在发现新的细胞因子家族，IL-17家族，的背景下确定了Th17细胞，IL-17家族目前由六个成员组成(IL-17A-F)。IL-17(以前称为CTLA-8)基本上由Th17细胞表达，并且已被指定为作为IL-17细胞因子家族中的原始分子的IL-17A。IL-17家族成员的序列与其他目前已知的哺乳动物蛋白质不具有同源性；因此，IL-17家族构成了独立的细胞因子家族。基于IL-17F的晶体结构建立的IL-17家族成员的结构特征与许多细胞因子相似；尽管结构分析暗示还可能存在异二聚体，但每个家族成员可能作为同型二聚体产生。最近，已经发现由活化的CD4+T细胞表达的异二聚体IL-17A和IL-17F通过IL-17R/IL-17RC的复合体传递信号(Wright J.F.等,J Immunol181:2799-2805(2001))。

编码人IL-17F的基因位于编码人IL-17A的基因附近(Hymowitz等,Embo J20(19):5332-41(2001))。IL-17A和IL-17F具有44％的氨基酸序列同一性，而IL-17家族的其他成员具有较低的序列同一性(15-27％)。这表明IL-17A和IL-17F形成IL-17家族的特殊亚组(Starnes等,J Immunol167(8):4137-40(2001)；Aggarwal和Gurney,J.Leukoc Biol71(1):1-8(2002))。已经发现IL-17F的生物作用类似于IL-17A的生物作用，例如，在多种细胞中刺激IL-6、IL-8和G-CSF产生的能力。与IL-17A一样，IL-17F能够诱导软骨基质的分泌并且抑制新软骨基质的合成(参见美国2002/0177188)。因此，与IL-17A一样，IL-17F可能有助于炎性疾病的病理。最近，作者观察到IL-17A和IL-17F两者均在暴露于白细胞介素23(IL-23)的T细胞中被诱导(Aggarwal等,J Biol Chem278(3):1910-4(2003))。观察到IL-17A和IL-17F具有相似的染色体定位和显着的序列相似性，以及IL-17A和IL-17F在响应特异性刺激的相同细胞群体中被诱导的事实导致鉴定出新的人细胞因子，其包含IL-17A和IL-17F的共价异二聚体。