[发明专利]一种氟西汀人工抗原的制备方法

权利要求书

1.一种氟西汀人工抗原的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)氟西汀半抗原中间体制备：

称取3g氟西汀盐酸盐，溶于50mL双蒸水，用1mol/L NaOH调节溶液pH值至7.5(1mol/LNaOH)，用乙酸乙酯萃取溶液3次，合并萃取液，减压蒸出乙酸乙酯，向残留物中依次加入50mL无水甲醇和0.8g丙烯酸甲酯，回流搅拌反应12h，反应结束后，将溶剂减压转干，将产物用硅胶柱层析纯化，提取得到氟西汀半抗原中间体；

2)氟西汀半抗原制备：

称取1.5g氟西汀半抗原中间体，加入10％的NaOH溶液30mL，回流反应2h，然后用6mol/LHCl调节溶液的pH至5.0，用乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液，减压蒸干，得到氟西汀半抗原；

3)氟西汀人工抗原制备

采用活泼酯法，将氟西汀半抗原与载体蛋白进行偶联，制备氟西汀免疫抗原和包被抗原。

2.如权利要求1所述的氟西汀人工抗原的制备方法，其特征在于，所述步骤3)的具体制备步骤如下：称取20mg氟西汀半抗原、10mg N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)，加入到2mL N，N-二甲基甲酰胺中，磁力搅拌下，缓慢加入140mg N，N-二环己基碳二亚胺固体，遮光条件下搅拌反应8h，离心取上清液，在磁力搅拌下将上清液逐滴加入到8mL溶解有载体蛋白的磷酸盐缓冲液(pH＝7.4)中，室温下搅拌反应12h，在4℃下用磷酸盐缓冲液(pH＝7.4)透析3d，分装，-20℃保存。

3.如权利要求2所述的氟西汀人工抗原的制备方法，其特征在于，所述离心条件为5000rpm下离心5min。

4.如权利要求2所述的氟西汀人工抗原的制备方法，其特征在于，所述载体蛋白为牛血清蛋白或卵血清蛋白。