[发明专利]一种奥贝胆酸及其制剂中有关物质的检测方法

权利要求书

1.一种奥贝胆酸及其制剂中有关物质检测方法，其特征在于检测方法包括以下步骤：

(1)色谱条件：

采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以磷酸盐缓冲液-乙腈-甲醇溶液为流动性，流动相A相是甲醇，所占体积比为35％～45％；流动相B相是乙腈，所占体积比为30％～40％；流动相C相是磷酸盐缓冲液，所占体积比为20％～30％；

(2)供试品溶液的配置：

量取奥贝胆酸或其制剂适量，加流动相配置成0.2mg/ml的溶液，作为供试品溶液；

(3)对照溶液的配置；

量取上述(1)供试品溶液适量，加流动相稀释成每1ml中约含2μg的溶液，作为对照溶液。

(4)测定方法；

取对照溶液10μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰高约为满量程的10％，再取供试品溶液10μl注入液相色谱仪，记录色谱图至奥贝胆酸主峰保留时间的2倍，供试品溶液色谱图中如有杂质峰，量取杂质峰面积的和，不得大于对照溶液中主峰的峰面积(1.0％)。

2.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所属步骤(1)中：所用的检测器为二极管阵列检测器。

3.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所属步骤(1)中：色谱柱温度在20℃～30℃，优选22℃。

4.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所属步骤(1)中：流速为0.6～1.5ml/min，优选1.0ml/min。

5.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所属步骤(1)中：流动相中，磷酸盐缓冲液为磷酸盐，如：磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、磷酸二氢铵等，最优选NaH₂PO₄。

6.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所属步骤(1)中：流动相中，磷酸盐缓冲液优选浓度0.005mol/L～0.05mol/L,pH值3.5～4.0，最优选0.01mol/L NaH₂PO₄溶液，pH值为3.8。

7.如权利要求1所述的奥贝胆酸及其相关制剂中有关物质的测定方法，其特征在于：最优检测条件如下：

检测器；二极管阵列检测器；

检测温度：22℃；

流速：1.0mol/min；

流动相：0.01mol/L NaH₂PO₄溶液：乙腈：甲醇的体积比为25:35:40。

8.如权利要求7所述的奥贝胆酸及其制剂中有关物质的测定方法的最优检测条件，其特征在于：流动相需要仪器自动混合，而不可提前将三相混合好后再使用。