[发明专利]用于扩增星头啄木鸟磁感应受体蛋白基因ISCA1片段的引物及其方法

权利要求书

1.一种用于扩增星头啄木鸟磁感应受体蛋白基因ISCA1片段的引物，其特征在于，所述引物包括第一引物对和巢式PCR引物，所述第一引物对包括序列号为SEQ ID NO.1的PIC-2L-F和序列号为SEQ ID NO.7的PIC-2L-R。

2.根据权利要求1所述用于扩增星头啄木鸟磁感应受体蛋白基因ISCA1片段的引物，其特征在于，所述巢式PCR引物包括第二引物对、第三引物对和第四引物对，所述第二引物对包括序列号为SEQ ID NO.1的PIC-2L-F和序列号为SEQ ID NO.2的PIC-PART2-1R；所述第三引物对包括序列号为SEQ ID NO.3的PIC-PART2-2F和序列号为SEQ ID NO.4的PIC-PART2-2R；所述第四引物对包括序列号为SEQ ID NO.5的PIC-PART2-3F和序列号为SEQ ID NO.6的PIC-PART2-3R。

3.根据权利要求1或2所述用于扩增星头啄木鸟磁感应受体蛋白基因ISCA1片段的引物，其特征在于，所述星头啄木鸟是采用鴷形目星头啄木鸟。

4.一种扩增星头啄木鸟磁感应受体蛋白基因ISCA1片段的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

（1）提取待测样品的总基因组DNA；

（2）将总基因组DNA采用权利要求1所述的第一引物对进行PCR扩增；

（3）步骤（2）扩增后的产物采用权利要求2所述的巢式PCR引物进行二次扩增；

（4）对步骤（3）二次扩增后的产物进行检测、拼接后得到ISCA1片段。

5.根据权利要求4所述方法，其特征在于，步骤（3）二次扩增后产物的条带中所含有的DNA片段的长度均在1kb-2kb之间。

6.根据权利要求4所述方法，其特征在于，步骤（2）中所述PCR扩增是以12.5uL的PCR扩增体系为基准，每条引物的浓度为5μM/L，体积为0.5μL，模板的用量为1μL。

7.根据权利要求6所述方法，其特征在于，步骤（2）中所述PCR扩增过程的退火温度均为55℃，退火时间为15s。

8.根据权利要求4所述方法，其特征在于，步骤（3）中所述二次扩增是以12.5uL的PCR扩增体系为基准，每条引物的浓度为5μM/L，体积为1.1μL ，模板的用量也为1μL。

9.根据权利要求8所述方法，其特征在于，步骤（3）中所述二次扩增过程的退火温度均为55℃，退火时间为30s。