[发明专利]酰化的GLP-1衍生物

说明书

本发明提供了一种酰化的GLP‑1衍生物，尤其是涉及到GLP‑1(7‑37)多肽衍生物的脂肪酸修饰的缀合物。另外，本发明还提供了该肽缀合物的制备方法、含该肽缀合物的药物以及在制备药物中的用途和中间体等。

技术领域

本发明属于多肽技术领域，具体而言，本发明涉及GLP-1(7-37)多肽类似物的脂肪酸修饰的缀合物。另外，本发明还涉及该肽缀合物的制备方法、含该肽缀合物的药物以及在制备药物中的用途和中间体等。

背景技术

糖尿病是一种由遗传和环境等多种因素引起的糖代谢紊乱疾病，现已成为继肿瘤、心脑血管疾病之后威胁人类健康和生命安全的第三位重大疾病。糖尿病本身不一定造成危害，但长期血糖增高，大血管、微血管受损并危及心、脑、肾、周围神经、眼睛、足等，据世界卫生组织统计，糖尿病并发症高达100多种，是目前已知并发症最多的一种疾病。因糖尿病死亡者有一半以上是心脑血管所致，10％是肾病变所致。因糖尿病截肢是非糖尿病的10～20倍。为此治疗糖尿病进而预防其并发症是至关重要的社会问题。

糖尿病由于患病机理不同可分为几种类型。其中绝大部分属于二型糖尿病(约90％)，主要是因体重过重和缺乏身体活动所致。II型糖尿病患者多存在胰岛素抵抗和胰岛素分泌不足两方面异常，在发病的中晚期往往出现胰岛β细胞凋亡。目前，临床使用的口服降糖药的作用机理多为增强胰岛素敏感性，或促进胰岛素分泌以稳定血糖，均无法解决β细胞凋亡这一难题。而胰高血糖素样肽-1(GLP-1)及其类似物药物由于具有减缓β细胞凋亡，增进其再生，促使胰岛β细胞分化并增殖的作用，使其成为治疗II型糖尿病的研究重点。

GLP-1是由回肠和结肠的L-细胞分泌的肠降血糖素。GLP-1的作用是以葡萄糖依赖的方式增加胰岛素释放从而防止低血糖症发生。由于这种性质，其作用于2型糖尿病的潜在治疗而受到关注。然而，使用GLP-1作为治疗药剂的主要障碍是其在血浆中小于4分钟的极其短的半衰期。

作为稳定肽并抑制它通过蛋白水解酶降解的方法，已经进行了一些实验来修饰对该蛋白水解酶敏感的特定氨基酸序列。由于GLP-1(7-37或7-36酰胺)通过二肽基肽酶IV(DPP IV)在第8位氨基酸(Ala)和第9位氨基酸(Asp)之间进行剪切而损失具有生物活性的GLP-1的药物浓度，因此具有减少血液中葡萄糖浓度以治疗2型糖尿病作用的GLP-1(7-37或7-36酰胺)具有4分钟或更短的生理活性半衰期(Kreymann等，1987)。因此，已经进行了各种关于具有抗DPP IV的GLP-1类似物的研究，并且已经进行了用Gly取代Ala(Deacon等，1998；Burcelin等，1999)或用Leu或D-Ala取代Ala(Xiao等，2001)的实验，从而保持它的活性的同时增加了对DPP IV的抗性。GLP-1的N末端氨基酸，His⁷对GLP-1的活性是重要的，并且作为DPP IV的目标。因此，美国专利第5545618号描述了用烷基或酰基修饰N末端，并且Gallwitz等描述了第7位His进行N甲基化或a甲基化，或者用整个His用咪唑取代来增加对DPP–IV的抗性并保持生理活性。

除了这些修饰，从希拉毒蜥蜴的唾液腺纯化的GLP-1类似物exendin-4(美国专利第5424686号)具有对DPP IV的抗性并比GLP-1具有更高的生理活性。因此，它具有比GLP-1的半衰期更长的2至4小时的体内半衰期。然而，仅适用增加DPP IV抗性的方法，生理活性不能被充分地保持，并且在使用商业可获得的exendin-4(exenatide)的情况下，它需要一天两次被注射给病人，这对病人仍然是很痛苦的。

这些促胰岛素肽具有一个问题，通常肽的大小很小，从而，它们不能在肾中被重新获得，并且它们随后被排出体外。因此，已经使用以化学方法在肽的表面添加例如聚乙二醇的具有高溶解度的聚合物来抑制在肾中的损失的方法。美国专利第692464号描述了PEG结合到exendin-4的赖氨酸残基来增加它的体内停留时间，然而，这种方法增加了PEG的分子量，从而增加了肽类药物的体内停留时间，同时随着分子量的增加，该肽类药物的浓度显著地减少，并且肽的反应性也降低了。因此，产量被不希望的降低了。