[发明专利]一种编码rhFGF-6的核酸片段、表达载体、宿主细胞、生产方法及应用

权利要求书

1.一种生产rhFGF-6的方法，其特征在于，其包括：将编码rhFGF-6的如SEQ ID NO.1所示的核酸片段构建到pET3a表达载体上，然后转化至宿主细胞，得到重组菌，培养所述重组菌，用诱导剂进行诱导表达，得到蛋白样品，所述蛋白样品经纯化处理后，得到纯净的所述rhFGF-6，所述宿主细胞为BL21(DE3)plysS。

2.根据权利要求1所述的生产rhFGF-6的方法，其特征在于，所述诱导剂为乳糖。

3.根据权利要求2所述的生产rhFGF-6的方法，其特征在于，所述诱导表达的条件为：在所述重组菌的对数生长中期，加入所述乳糖至终浓度为28-32mM，在pH7.0-7.2，33-35℃条件下，培养4h-6h。

4.根据权利要求1所述的生产rhFGF-6的方法，其特征在于，所述纯化处理是：将变性后的所述蛋白样品进行复性后经过CM或SP离子交换、再经肝素柱层析获得纯净的所述rhFGF-6；或将变性后的所述蛋白样品经过CM或SP离子交换，进行复性后再经肝素柱层析获得纯净的所述rhFGF-6；或将变性后的所述蛋白样品经CM或SP离子交换进行柱上复性、纯化，再经肝素柱层析获得纯净的所述rhFGF-6；所述变性处理是：用变性缓冲液对所述蛋白样品进行处理，使所述蛋白样品变性、溶解。