[发明专利]人类Y染色体29个STR基因座的荧光标记复合扩增试剂盒

权利要求书

1.一种人类Y染色体29个STR基因座的荧光标记复合扩增试剂盒，其特征在于：所述的试剂盒包含29对STR基因座的特异性扩增引物，其中STR基因座为:DYS389Ⅰ/Ⅱ、DYS458、DYS19、DYS385a/b、DYS393、DYS391、DYS439、DYS635、DYS392、Y GATA H4、DYS437、DYS438、DYS448、DYS456、DYS390、DYS449、DYS576、DYS481、DYS549、DYS533、DYS570、DYS643、DYS460、DYS627、DYS387a/b、DYS518。

2.根据权利要求1所述的一种人类Y染色体29个STR基因座的荧光标记复合扩增试剂盒，其特征在于：针对上述29个基因座在其重复序列的侧翼分别设计特异性荧光标记引物。

3.根据权利要求1所述的一种人类Y染色体29个STR基因座的荧光标记复合扩增试剂盒，其特征在于：所述的26对STR基因座的特异性扩増引物分为五组:第一组，DYS392、DYS389I、DYS449、DYS389II、DYS438、DYS526、DYS570；第二组，DYS391、DYS456、DYS19、DYS448、DYS385a、DYS385b；第三组,DYS481、DYS437、DYS390、DYS460、DYS533、DYS458；第四组,DYS393、Y GATA H4、DYS439、DYS635、DYS570、DYS643；第五组,DYS549、DYS627、DYS387a、DYS387b、DYS518；每对引物中至少一条采用荧光染料标记其5'端。

4.根据权利要求1所述的一种人类Y染色体29个STR基因座的荧光标记复合扩增试剂盒，其特征在于：所述的人类Y染色体29个STR基因座的荧光标记复合扩增试剂盒包括反应混合液、26对STR基因座的特异性扩増引物、29个基因座的等位基因、热启动Taq酶、DNA标准品、sdH20和荧光分子量内标，具体成分为：

5.根据权利要求1所述的一种人类Y染色体29个STR基因座的荧光标记复合扩增试剂盒，其特征在于：所述的反应混合液的组成为：MgCl₂ 7.5mM，Tris-HCl 125mM，KCl 125mM，dNTPs7.5mM，BSA 2g/L。

6.一种采用权利要求1-5任一所述的人类Y染色体29个STR基因座的荧光标记复合扩增试剂盒在法医鉴定、亲权鉴定和DNA家谱构建中的检测方法，其特征在于：具体检测方法为：将试剂盒内试剂与样品DNA装入PCR扩増管，置于热循环仪上，进行PCR扩增，然后在4℃的条件下进行保温，得到扩增产物，将扩增产物在遗传分析仪上进行荧光检测，再用片段分析软件GeneMapper分析基因测序仪上进行检测，即得到检测结果。

7.根据权利要求6所述的一种检测方法，其特征在于：Y染色体STR基因座的扩増采用聚合酶链式反应，其扩増产物的检测采用毛细管电泳、聚丙烯酰胺或琼脂糖凝胶电泳，聚合酶链式反应的扩增程序为：95℃2min，94℃30S、59℃1min、72℃1min，共29个循环；60℃30min。

8.根据权利要求6所述的一种检测方法，其特征在于：所述的样品DNA包括利用Che1ex法、磁珠提取法或有机抽提法中任意一种方法提取的人基因组DNA，或采用免提取的、滤纸、FTA卡、棉签、纱布中任意一种裁体收集的人类血液或口腔细胞。

9.根据权利要求6所述的一种检测方法，其特征在于：所述的检材的来源包括人的血液、血痕、精液、唾液、体液、毛发、肌肉或组织器官。