[发明专利]基于HPCE建立新疆紫草指纹图谱的方法及应用有效
申请号: | 201710007836.8 | 申请日: | 2017-01-05 |
公开(公告)号: | CN107525840B | 公开(公告)日: | 2020-08-04 |
发明(设计)人: | 申刚义;张蕾;张爱芹;王嫚 | 申请(专利权)人: | 中央民族大学 |
主分类号: | G01N27/447 | 分类号: | G01N27/447 |
代理公司: | 北京元中知识产权代理有限责任公司 11223 | 代理人: | 王明霞 |
地址: | 100081 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 hpce 建立 新疆 紫草 指纹 图谱 方法 应用 | ||
1.基于HPCE建立新疆紫草指纹图谱的方法,其特征在于,包括:
(1)新疆紫草的供试品溶液的制备:称取新疆紫草2.00g,向其中加入无水乙醇30mL超声30min,减压抽滤,收集滤液后,再将滤渣重新超声过滤;将两次滤液合并,旋蒸浓缩得到8mL新疆紫草粗提液,于4℃冰箱避光保存备用,实验前用pH为8.0的缓冲液定容至20mL,缓冲液包括100mmol·L-1的硼酸盐缓冲液、25mmol·L-1的SDS和体积分数为20%的无水乙醇,得0.05mg·mL-1供试品;
(2)对照品溶液的制备:精密称定左旋紫草素和乙酰紫草素各0.5mg,用pH为8.0的缓冲液定容至5mL容量瓶,缓冲液包括100mmol·L-1的硼酸盐缓冲液、25mmol·L-1的SDS和体积分数为20%的无水乙醇,得0.1mg·L-1的对照品混合液;
(3)将供试品溶液和对照品溶液进行毛细管电泳分析:
电泳条件:毛细管柱用前依次用0.1mol·L-1NaOH溶液、水、运行缓冲溶液分别冲洗10min,两次进样间用运行缓冲溶液分别冲洗5min,毛细管柱隔4小时用0.1mol·L-1NaOH溶液和水分别冲洗10min;
毛细管电泳分析中的运行缓冲液pH为8.0,包括体积分数为20%的无水乙醇,浓度为100mmol·L-1的硼酸盐缓冲液,以及25mmol·L-1的十二烷基硫酸钠;分离电压:25kV,检测波长214nm;对照品溶液和供试品溶液的进样压力为3.45kPa,进样时间为5s;
(4)获得新疆紫草毛细管电泳图谱:所述毛细管电泳图谱中包括6个特征峰,按照出峰时间顺序,出的第一个峰为左旋紫草素,第三个峰为乙酰紫草素。
2.一种权利要求1所述的基于HPCE建立新疆紫草指纹图谱的方法在评价新疆紫草质量或者鉴别紫草类型中的应用。
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