[发明专利]一种单纯疱疹病毒I型和II型抗原联检试剂盒

权利要求书

1.一种单纯疱疹病毒I型和II型抗原联检试剂盒，所述试剂盒由试剂条和塑料卡组装而成，所述试剂条包括底板，所述底板上粘贴有带有检测线和质控线的反应膜，所述反应膜靠近检测线的一端依次叠加粘贴有胶体金垫、样品垫，所述反应膜靠近质控线的一端叠加粘贴有吸收垫，所述反应膜上有两条检测线，分别包被了单纯疱疹病毒I型和II型多克隆抗体，所述反应膜上质控线包被了羊抗鼠IgG抗体，所述胶体金垫上包被了胶体金标记的鼠源抗单纯疱疹I型和II型单克隆抗体，其特征在于：

所述反应膜由以下方法制得：用缓冲液将单纯疱疹病毒I型和II型多克隆抗体分别稀释至包被浓度为0.8~1.2mg/mL，将羊抗鼠IgG抗体稀释至包被浓度为1.5~1.8mg/mL，在反应膜上分别划线单纯疱疹病毒I型、II型多克隆抗体检测线和羊抗鼠IgG抗体质控线，划线后将反应膜置于干燥间，温度20~25℃，湿度小于30%，干燥4~5小时；

所述胶体金垫由以下方法制得：取100mL 0.01%氯金酸与2.0~3.0mL 1%柠檬酸三钠充分混匀后，调节pH值为7.5~8.5，加入椰油酰胺丙基甜菜碱，然后置于微波炉中加热搅拌15~20min，待其冷却后用双蒸水补至原体积，制得胶体金溶液，取100mL胶体金溶液放在烧杯内，用0.2M K₂CO₃调至pH8.0，按100mL胶体金溶液加入1.5mg鼠源抗单纯疱疹I型单克隆抗体和1.5mg鼠源抗单纯疱疹II型单克隆抗体，再缓慢添加0.2M K₂CO₃将胶体金溶液调至pH9.5，添加K₂CO₃的时间为5分钟，然后室温搅拌30分钟，加入终浓度为10mg/mL牛血清白蛋白，1mg/mL聚乙烯吡咯烷酮封闭20~30min，12000r/m离心30min，弃上清，用缓冲液复溶至50mL，按1mL溶液铺20cm²的比例均匀地铺在玻璃纤维膜上，再置于干燥间，温度20~25℃，湿度小于30%，干燥4~5小时；

所述椰油酰胺丙基甜菜碱的加入量为2~5g；

所述置于微波炉中加热搅拌步骤的微波加热的功率为600~700w。

2.如权利要求1所述单纯疱疹病毒I型和II型抗原联检试剂盒，其特征在于，所述缓冲液为0.1mol/L pH8.5磷酸盐缓冲溶液。

3.如权利要求1所述单纯疱疹病毒I型和II型抗原联检试剂盒，其特征在于，所述胶体金溶液制备中的搅拌速度为60~80r/min。

4.如权利要求1所述单纯疱疹病毒I型和II型抗原联检试剂盒，其特征在于，所述反应膜为硝酸纤维素膜。

5.如权利要求1所述单纯疱疹病毒I型和II型抗原联检试剂盒，其特征在于，所述样品垫为玻璃纤维膜。