[发明专利]一种载药聚合物纳米胶束及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及医药技术领域，特别涉及载药纳米材料技术领域，具体涉及一种载药聚合物纳米胶束及其制备方法和应用。

背景技术

新生血管网络的形成是肿瘤增殖和转移扩散的重要因素。从已经存在的血管中产生新血管的过程叫做血管新生。因此，靶向肿瘤血管的血管新生被认为是治疗肿瘤的里程碑。肿瘤血管的细胞表面和细胞外基质会表达各种特异性蛋白标志物，这些蛋白标志物在正常细胞中不会表达或者表达水平比肿瘤中低很多。因此，血管新生的肿瘤细胞表面的受体容易锚定特定的靶向分子，如抗体、生物分子、DNA、核酸适配体和多肽等。具有靶向能力的配体能够输送药物或者大分子到达肿瘤血管或肿瘤细胞，从而降低其对正常细胞或组织的毒副作用。不过，与其他化疗治疗一样，抗血管新生的治疗不能产生持久的疗效来使肿瘤大大缩小甚至消失。为了解决这一问题，研究人员设计并开发了具有双重靶向作用的多肽。

CGKRK(Cys-Gly-Lys-Arg-Lys)多肽与肿瘤血管和细胞的血管新生的内表面具有高度的结合能力和特异性。线粒体蛋白p32被认为是CGKRK多肽的受体，它在多种肿瘤细胞表面都有较高的表达水平。促凋亡D-氨基酸多肽KLAKLAKKLAKLAK(又名D(KLAKLAK)₂)是一种阳离子型α螺旋两亲性的多肽，它能够通过扰乱线粒体膜来诱导细胞凋亡。这种肽能够穿透细菌的细胞壁，因此通常用于杀菌；但是它对真核细胞的细胞质膜的穿透能力有限，因此对真核细胞的毒性较小。

为了加强D(KLAKLAK)₂对肿瘤细胞的杀伤力，研究者将特异性靶向肿瘤的多肽CGKRK与D(KLAKLAK)₂连接起来。在连接起来的多肽CGKRK-D(KLAKLAK)₂中，CGKRK部分靶向肿瘤血管的血管新生；D(KLAKLAK)₂部分作用于线粒体膜，通过凋亡途径来杀死肿瘤细胞。但是，CGKRK-D(KLAKLAK)₂虽然具有肿瘤特异性靶向作用，它仍然呈现出明显的系统毒性。由于纳米载体输送能够明显降低系统毒性，因此该多肽药物被化学连接到多种纳米载体上。

近年来，聚合物胶束作为一种药物输送载体在肿瘤治疗研究中引起了很大重视。聚合物胶束载药范围广、结构稳定、表面易于修饰，具有优良的组织渗透性,体内滞留时间长,能使药物有效地到达靶点。而且聚合物胶束由于单体选择丰富，能够根据需要进行定制。近几年的研究中，pH敏感的聚合物胶束研究得较为广泛。肿瘤细胞与正常细胞和组织(pH 7.4)相比，通常具有较低的pH(6.5-7.2)。在细胞内，核小体和溶酶体也有较低的pH(5.0-6.0)。这些酸性条件使得pH敏感的聚合物胶束成为肿瘤治疗的理想载体。

2000年，Robert Langer团队首次合成聚β-胺酯作(PBAE)为递送基因的纳米载体。聚β-胺酯含有对pH敏感的叔胺，其主链上含有的酯键也能够在生理条件下降解，因此聚β-胺酯是一种生物可降解的、pH敏感的聚合物，它被应用于药物递送、药物和基因的共同递送。到目前为止，还没有研究者将CGKRK-D(KLAKLAK)₂用pH敏感的聚β-胺酯来递送。

因此，在本领域中期望能够得到一种可递送CGKRK-D(KLAKLAK)₂进入真核细胞的细胞核的载药纳米胶束。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种载药聚合物纳米胶束及其制备方法和应用，所述载药聚合物纳米胶束对pH敏感，可以共载促凋亡多肽和抗肿瘤药物，且对血管新生具有靶向作用。

为达到此发明目的，本发明采用以下技术方案：

一方面，本发明提供一种载药聚合物纳米胶束，以含有聚β-胺酯的两亲性聚合物作为载体，所述载体与促凋亡多肽共价连接，形成所述载药聚合物纳米胶束。

本发明中，针对纳米药物存在难以从溶酶体逃逸的问题，将pH敏感的含有聚β-胺酯的两亲性聚合物与靶向性促凋亡多肽CGKRK-D(KLAKLAK)₂共轭连接，使其自组装成纳米胶束，胶束内核为聚β-胺酯，胶束外壳为亲水性基团，不仅能够延长纳米胶束在血液中的循环时间，还可以使得靶向性促凋亡多肽能够穿透真核细胞，进入真核细胞细胞核，对细胞本身不会产生毒性。