[发明专利]一种提纯阿尼芬净前体化合物的方法

说明书

本发明公开了一种提纯阿尼芬净前体化合物的方法，该方法包括絮凝；酸化；压滤；纳滤；萃杂；盐析；重结晶等工艺步骤。本发明主要是对发酵转化液加入硅藻土搅拌絮凝，再用盐酸调节pH，板框压滤收集压滤滤液，压滤滤液进行低温纳滤浓缩，纳滤浓缩液加入甲基叔丁基醚搅拌萃取，弃去杂质有机相，水相加入甲醇析晶，重复析晶工艺，重结晶得到阿尼芬净前体化合物。本发明的优点是采用甲基叔丁基醚进行萃取，无需进行树脂柱或者硅胶柱等纯化工艺，既能够有效去除大部分的杂质，又能大大减少溶剂的消耗量；同时水相使用低分子醇进行盐析工艺析晶，工艺简单易行，成本大幅度降低，便于实现工业化生产。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，涉及一种棘白菌素类抗真菌化合物的纯化方法。具体为一种提纯阿尼芬净前体化合物的方法。

背景技术

阿尼芬净是第三个上市的棘白菌素类抗真菌药，用以治疗念珠菌菌血症及腹腔脓肿、腹膜炎、食管念珠菌等其它类型的念珠菌感染，具有较好的抗真菌活性。阿尼芬净(anidulafungin)已显示出抗各种念珠菌病的活体内和活体外活性的功效。在2005年的ICAAC会议上发表的研究表明：阿尼芬净与氟康唑比较用于治疗念珠菌血症和侵入性念珠菌病。患者被随机接受静脉注射的阿尼芬净100mg/d或静脉注射的氟康唑400mg/d。在10或更多天的静脉注射治疗后，任一组的患者被转到口服的氟康唑。研究结果证明接受阿尼芬净患者的整体成功率高于使用氟康唑的患者。阿尼芬净属于棘白菌素类抗真菌药物，2006年2月21日，由辉瑞公司生产的阿尼芬净通过了美国FDA认证，用于治疗食管感染和其他形式的念珠菌感染。根据CN201310146413.6中公开了一种用硅胶柱层析纯化阿尼芬净粗品的方法，包括以下步骤：(1)制备干样：向阿尼芬净粗品中加入有机溶剂溶解，充分溶解后加入硅胶，搅拌均匀后干燥，制得阿尼芬净干样；(2)加压洗脱：将阿尼芬净干样均匀填在装有硅胶的层析柱顶端，加入洗脱溶剂进行加压洗脱，用高效液相色谱进行监测，收集阿尼芬净含量大于98％的洗脱液；(3)浓缩：将阿尼芬净含量大于98％的洗脱液，浓缩至干，得到含量大于98％的阿尼芬净纯品；CN103965298A专利中公开一种用大孔树脂柱纯化阿尼芬净的方法，包括(a)取阿尼芬净粗品，上样于大孔吸附树脂；(b)用酸性或中性水溶液洗涤树脂柱，再用体积百分比为0％-50％有机溶剂的酸性水溶液洗涤树脂柱；(c)用体积百分比为40％-80％有机溶剂的酸性水溶液洗脱吸附于树脂上的阿尼芬净，收集洗脱液；(d)合并收集得到的洗脱液，分离得到阿尼芬净。

但是这两种方法所消耗的溶剂量较大，三废产生量较多，生产周期较长和成产成本较大，为此，本发明提出一种可简单去除，提高纯度的方法，便于实现化生产。

发明内容

本发明的目的在于提供一种提纯阿尼芬净前体化合物的方法，以解决背景技术中提出的问题。

为实现目的，本发明提供如下技术方案，一种提纯阿尼芬净前体化合物的方法，该方法包括以下步骤：

S1：絮凝，向发酵转化液中加入硅藻土，搅拌均匀；S2：

酸化，向步骤S1中絮凝后的转化液中调节pH值；

S3：板框压滤，将步骤S2酸化后的絮凝物经板框压滤设备压滤，收集压滤滤液；

S4：纳滤，让步骤S3中压滤后的滤液经纳滤设备浓缩，浓缩完成后用去离子水冲洗纳滤设备，收集液合并至纳滤浓缩液；

S5：萃杂，将步骤S4制得的纳滤浓缩液加入甲基叔丁基醚，搅拌萃取，停止搅拌，静置分层，弃去上层杂质有机相，取下层水相，向水相中加入甲醇，调节甲醇体积分数；

S6：盐析，控制步骤S5甲醇水溶液的温度，加入氯化钠，缓慢降温，搅拌结晶，过滤，得到粗品；

S7：重结晶，向上述粗品加入的甲醇水溶液，控制温度，加入氯化钠，调节氯化钠的溶解度，降温，搅拌结晶，过滤，得到湿品；

S8：湿品进入真空干燥箱，真空干燥得到产品；