[发明专利]一种阳离子化香菇多糖的制备方法及其应用

权利要求书

1.一种阳离子化香菇多糖，其特征在于，通过pH敏感型化学键将香菇多糖与低分子量的聚乙烯亚胺连接，香菇多糖分子量为20-800kD，聚乙烯亚胺分子量为600-1200D，聚乙烯亚胺与香菇多糖的摩尔比为1:3-10。

2.根据权利要求1所述的阳离子化香菇多糖的制备方法，其特征在于，1）将50-150mg香菇多糖溶解于8-10ml去离子水或二甲基亚砜中，在23-27℃，氮气保护下与100-450mg活化试剂A避光反应4-48h，将反应液透析2-3d，或者在50℃与100-450mg活化试剂B反应4-24h，得活化的香菇多糖；所述的活化试剂A为高碘酸钾、乙二胺、含有3-5%乙二胺的磷酸盐缓冲液、羰基二咪唑、三乙胺的一种或两种以上，活化试剂B为马来酸酐、琥珀酸酐、4-二甲胺基吡啶、1-乙基(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐、 N-羟基琥珀酰亚胺的一种或两种以上；

2）将100-300mg聚乙烯亚胺溶于2-6ml体积浓度为3.7% 的盐酸或二甲基亚砜中，然后在氮气保护下接枝到活化的香菇多糖上，或者直接将100-300mg聚乙烯亚胺接枝到活化的香菇多糖上，在23-27℃，氮气保护下，避光反应24-72h，于超纯水中透析2-3d，冷冻干燥，得聚乙烯亚胺修饰的香菇多糖，即阳离子化香菇多糖。

3.根据权利要求2所述的阳离子化香菇多糖的制备方法，其特征在于，1）将100 mg香菇多糖溶于10mL去离子水中，边搅拌边加入150mg高碘酸钾，在25℃，氮气保护下避光反应48h，再滴入含有200μL乙二胺的5mL磷酸盐缓冲液，于1h内滴加完毕，氮气保护下避光搅拌36 h，将反应液于超纯水中透析3d，得活化的香菇多糖反应液；

2）再向活化的香菇多糖反应液中逐滴加入含有250mg聚乙烯亚胺的2mL体积浓度为3.7%的盐酸，在25℃，氮气保护下，避光搅拌72 h，于超纯水中透析2d，冷冻干燥，得聚乙烯亚胺修饰的香菇多糖，即阳离子化香菇多糖。

4.根据权利要求2所述的阳离子化香菇多糖的制备方法，其特征在于，1）将100mg香菇多糖溶于8mL二甲基亚砜中，然后加入30mg羰基二咪唑和100μL三乙胺，在26℃，氮气保护下避光搅拌4h，得活化的香菇多糖反应液；

2）再向活化的香菇多糖反应液中逐滴加入含有100mg聚乙烯亚胺的6mL二甲基亚砜溶液，在23℃，氮气保护下，避光搅拌24h，于超纯水中透析2d，冷冻干燥，得到聚乙烯亚胺修饰的香菇多糖，即阳离子化香菇多糖。

5.根据权利要求2所述的阳离子化香菇多糖的制备方法，其特征在于，1）将100 mg香菇多糖溶于10 mL二甲基亚砜中，依次加入10mg 4-二甲胺基吡啶和400mg马来酸酐，50℃下搅拌24h，再依次加入10mg 1-乙基(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和5mg N-羟基琥珀酰亚胺搅拌反应4h，得活化的香菇多糖反应液；

2）再向活化的香菇多糖反应液中加入300mg聚乙烯亚胺，氮气保护下，避光搅拌48h，于超纯水中透析2d，冷冻干燥，得到聚乙烯亚胺修饰的香菇多糖，即阳离子化香菇多糖。

6.根据权利要求2所述的阳离子化香菇多糖的制备方法，其特征在于，1）将100 mg香菇多糖溶于10mL二甲亚砜中，依次加入10mg 4-二甲胺基吡啶和400mg琥珀酸酐，50℃下搅拌24h，再依次加入10mg l-乙基(3一二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和50mgN-羟基琥珀酸亚胺搅拌反应4h，得活化的香菇多糖反应液；

2）再向活化的香菇多糖反应液中加入300mg聚乙烯亚胺，氮气保护下，避光搅拌48h，将反应液于超纯水中透析3d，冷冻干燥，得到聚乙烯亚胺修饰的香菇多糖，即阳离子化香菇多糖。

7.权利要求1所述的阳离子化香菇多糖作为核酸传递载体在制备肿瘤治疗药物中的应用。

8.权利要求2-6任一项所述制备方法制备的阳离子化香菇多糖作为核酸传递载体在制备肿瘤治疗药物中的应用。