[发明专利]一种不同溶解性的贻贝蛋白及多肽的制备方法在审
申请号: | 201710015510.X | 申请日: | 2017-01-10 |
公开(公告)号: | CN106928332A | 公开(公告)日: | 2017-07-07 |
发明(设计)人: | 杜明;乔美玲;陈慧;樊凤娇;石璞洁;王震宇;徐献兵 | 申请(专利权)人: | 大连工业大学 |
主分类号: | C07K14/435 | 分类号: | C07K14/435;C07K1/34;C07K1/14;C12P21/06 |
代理公司: | 大连科技专利代理有限责任公司21119 | 代理人: | 佟蕊 |
地址: | 116000 辽宁*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 不同 溶解性 贻贝 蛋白 多肽 制备 方法 | ||
1.一种不同溶解性贻贝蛋白的制备方法,其特征在于,清洗、去壳、去足丝,匀浆;依次分步进行肌浆蛋白、肌原纤维蛋白、基质蛋白的提取得到相应的提取液,再分别进行超滤,最后进行喷雾干燥得到蛋白粉。
2.根据权利要求1所述的不同溶解性贻贝蛋白的制备方法,其特征在于,肌浆蛋白提取液为0.05mol/L,pH=7的磷酸缓冲溶液,浸提时间30-90min,浸提次数2-3次,温度2-4℃,料液比1:3-1:20,浸提后进行离心,最终蛋白液用10000Da超滤膜过滤。
3.根据权利要求1所述的不同溶解性贻贝蛋白的制备方法,其特征在于,肌浆蛋白提取液为0.05mol/L,pH=7的磷酸缓冲溶液,浸提时间30-90min,浸提次数2-3次,温度2-4℃,料液比1:3-1:20,浸提后进行离心,最终蛋白液用10000Da膜超滤过滤。
4.根据权利要求1所述的不同溶解性贻贝蛋白的制备方法,其特征在于,基质蛋白提取液为2%-5%的柠檬酸溶液,浸提时间60-90min,浸提次数2-4次,温度30-70℃;浸提后进行离心,最终蛋白液用10000Da膜超滤。
5.根据权利要求1所述的不同溶解性贻贝蛋白的制备方法,其特征在于,采用喷雾干燥的进口温度130-170℃,出口温度60-90℃,进行喷雾干燥之前的可对蛋白液进行蒸发浓缩,使其固形物含量是15-50%。
6.根据权利要求5所述的不同溶解性贻贝蛋白的制备方法,其特征在于,采用低温喷雾干燥的方式进行干燥,进风温度68-80℃,出风温度30-45℃,固形物含量要求15-50%,干燥之后的样品控制在5%以内。
7.由权利要求1-6任一项所述的贻贝蛋白制备贻贝多肽的方法,其特征在于,对蛋白提取液酶解、灭酶、离心取上清液、超滤、再进行喷雾干燥得到多肽粉。
8.根据权利要求7所述的制备贻贝多肽的方法,其特征在于,所述酶解的条件是:胰蛋白酶pH8-9、温度40-47℃、时间2-6h;加酶量3000-5000U/g。
9.根据权利要求7所述的制备贻贝多肽的方法,其特征在于,沸水浴5-15min进行灭酶。
10.根据权利要求1所述的制备贻贝多肽的方法,其特征在于,待灭酶后的样品冷却至室温后,进行离心,转速8000-10000g/min、时间5-15min。
11.根据权利要求1所述的不同溶解性贻贝蛋白的制备方法,其特征在于,离心后将上清液经过超滤,收集分子量3K以下的酶解液,除去大分子物质。
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