[发明专利]一种不同溶解性的贻贝蛋白及多肽的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种不同溶解性的贻贝蛋白及多肽的制备方法。

背景技术

贻贝是贝类养殖事业中的重要种类，生产数量也很大。贻贝干品蛋白含量在60%左右，经济价值很高，也有一定的实用价值。为了更充分的开发利用贻贝，本发明采用分步提取的方法使原料的蛋白质溶出，同时也较好的根据蛋白溶解性差异，把原料中的混合蛋白进行了分离，便于后期对不同的蛋白进行研究。

目前的研究中，关于贻贝蛋白的组成、含量等没有确切的报道，贻贝蛋白中各种组分的氨基酸序列更是鲜有报道。这对于贻贝蛋白的深入研究，具有一定的限制。这种限制主要表现在两个方面，简述如下：

第一，由于蛋白质在不同体系中的溶解性存在一定的差异，如果我们能够根据蛋白质的溶解性进行分类，那么在液态食品体系中根据体系特性使用不同溶解性的蛋白质，极有可能提高体系的稳定性，有效保持产品品质。因此，根据溶解性对蛋白进行分类提取制备具有一定的意义。

第二，贻贝中含有不同种类的蛋白质，是通过生物酶解法获得生物活性肽的良好蛋白质来源。然而由于体系的复杂程度较大，对于我们进行定向酶切技术的应用具有一定的限制。因此，通过溶解性的不同将贻贝蛋白进行分类制备，就可以一定程度上减少体系的复杂程度，同时可以为贻贝蛋白的进一步分离制备提供有效的理论和技术基础，该发明具有一定的实用价值。

贻贝，又名淡菜﹑海红﹑海夫人，主要有条纹贻贝﹑紫贻贝和厚壳贻贝，贻贝在分类上属于软体动物门(Mollusca)、瓣鳃纲(Lamellibranchia)、异柱目(Anisomyaria)、贻贝科(Mytilidae)海洋生物。我国已发现的有近50种，分18个属。它们的贝壳都呈三角形，表面有一层黑漆色发亮的外皮。贻贝味道极鲜，营养丰富，它所含蛋白质﹑碘﹑钙和铁都比较多，但所含脂肪很少。产自浙江﹑福建﹑山东﹑辽宁等沿海省份，养殖量极大。在海产食品中，低值的贻贝并未充分利用，因此研究与开发贻贝提高它的利用价值就有十分重要的意义。本专利从蛋白质的角度对贻贝进行初步分析，以便寻求新的思路提高贻贝的利用率。

贻贝中根据溶解性的不同分为肌浆蛋白，肌原纤维蛋白，基质蛋白。利用肌浆蛋白溶于水溶液或稀盐溶液，肌原纤维蛋白溶于一定浓度的盐溶液，基质难溶于水的特性，将贻贝中的混合蛋白进行了适当的分离。

但目前报道的贻贝蛋白的提取技术方法有三个方面的局限性：

（1）对于三种溶解性蛋白的分步提取技术不明确；

（2）各种蛋白的提取率较低；

（3）制备出的蛋白质未能经过后续处理，并开发成可以直接应用的产品。

国内外对贻贝的药用食用价值已经做了大量的研究工作，取得了不少成绩，部分已在医药及食品的生产中得到了应用。但贻贝在我国养殖区域广，产量大，无论从药用的角度，还是从保健食疗的角度均具有广阔的开发前景。在我国，贻贝主要是新鲜或者粗加工后供民间食用，如果能够结合研究成果，加强活性成分的确定，分离，提取，药理和临床等基础研究，发展出相应的保健食品及其药品，不仅对疫病的预防和治疗有贡献，而且会产生较大的社会效益及经济效益。

目前，对贻贝蛋白的分离、提取及理化性质的研究鲜有报道。针对蛋白分级的研究较多集中在小麦、大米、荞麦等农作物蛋白源，而对于贻贝蛋白的分级以及提取工艺的研究鲜有报道。

分别用这些蛋白进行酶解，得到不同的三种酶解多肽产物，具有不同的应用方向和研究价值，提高了原料的利用率。

发明内容

本发明首先对原料进行充分的利用，一批次处理可以获得三类蛋白，且蛋白具有一定特征分子量。分别用这些蛋白进行酶解，得到不同的三种酶解多肽产物，提高了原料的利用率。

本发明的技术方案是这样实现的： 一种不同溶解性贻贝蛋白的制备方法，清洗、去壳、去足丝，匀浆；依次分步进行肌浆蛋白、肌原纤维蛋白、基质蛋白的提取得到相应的提取液，再分别进行超滤，最后进行喷雾干燥得到蛋白粉。

进一步地，肌浆蛋白提取液为0.05mol/L，pH=7的磷酸缓冲溶液，浸提时间30-90min，浸提次数2-3次，温度2-4℃，料液比1:3-1:20，浸提后进行离心，最终蛋白液用10000Da超滤膜过滤。

进一步地，肌浆蛋白提取液为0.05mol/L，pH=7的磷酸缓冲溶液，浸提时间30-90min，浸提次数2-3次，温度2-4℃，料液比1:3-1:20，浸提后进行离心，最终蛋白液用10000Da膜超滤过滤。