[发明专利]一种人源脂肪间充质干细胞因子及其制备方法和用途

权利要求书

1.一种人源脂肪间充质干细胞因子的制备方法，其特征在于：它包括如下步骤：取人脂肪间充质干细胞，置于高辅酶无血清培养基中，培养至细胞汇合度75～85％时，收集上清液，即可；其中，所述高辅酶无血清培养基是每1L添加有辅酶A 10mg～28mg、辅羧酶5mg～15mg、黄素腺嘌呤二核苷酸4mg～12mg、尿苷酸磷酸0.5mg～2.5mg的间充质干细胞无血清培养基；

所述培养是在低氧条件下培养，其中，24h内细胞的氧浓度为21％，24h～26h氧浓度由21％均匀降到18％，第27h的氧浓度为18％，第28～36h氧浓度由18％均匀降到8％，第37h的氧浓度为8％，第38h～44h氧浓度由8％均匀降到2％，后持续于2％的氧浓度下培养。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述人脂肪间充质干细胞的细胞活率为97.3％。

3.一种人源脂肪间充质干细胞因子浓缩液的制备方法，其特征在于：步骤如下：

a、按照权利要求1或2所述的方法培养，得培养液上清；

b、过滤、浓缩。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：所述过滤、浓缩的方法是：先采用0.22μm滤膜过滤；然后通过40KD超滤膜，收集透析液，再将透析液通过100D超滤膜，收集截留液，得到细胞因子浓缩液， 即可。

5.权利要求3或4所述的方法制备得到的人源脂肪间充质干细胞因子浓缩液。

6.一种人源间充质干细胞因子冻干粉的制备方法，其特征在于：步骤如下：取权利要求5所述的细胞因子浓缩液，冻干，得人源间充质干细胞因子冻干粉。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：冻干前，先加入冻干保护剂；其中，所述冻干保护剂每100ml中含有如下组分：生育酚0.5g、谷胱甘肽0.4g、人白蛋白0.5ml、右旋糖苷3.5g、海藻糖1.5g、甘露醇4g、羟脯氨酸0.05g、精氨酸0.2g、组氨酸0.2g、蛋氨酸0.2g、酪氨酸0.2g、氨基乙酸2g、柠檬酸钠0.26g。

8.权利要求6或7所述方法制备得到的人源间充质干细胞因子冻干粉。

9.权利要求5所述细胞因子浓缩液或权利要求8所述细胞因子冻干粉在制备化妆品或者修复皮肤损伤的药物中的用途。

10.一种细胞因子化妆品或药物，其特征在于：每10ml化妆品或药物中包含权利要求8所述的间充质干细胞因子冻干粉0.005～0.05g，生物多糖胶0.1～0.145g，胶原蛋白溶液0.3ml，叶酸0.05g。

11.根据权利要求10所述的细胞因子化妆品或药物，其特征在于：每10ml化妆品或药物中包含权利要求8所述的间充质干细胞因子冻干粉0.05g，生物多糖胶0.1g，胶原蛋白溶液0.3ml，叶酸0.05g。