[发明专利]米根霉菌体全细胞催化制备L-乳酸的方法

权利要求书

1.一种米根霉菌体全细胞催化制备L-乳酸的方法，该方法包括将米根霉孢子液接入到菌体培养液中进行米根霉菌体培养，其特征在于米根霉菌体培养18-24小时后，过滤，回收菌体，将回收后的菌体置入催化反应器中，以菌体培养液为催化体系，过量的碳酸钙作为中和剂，通过补加葡萄糖进行全细胞乳酸催化反应，直至反应至菌体培养液成固状且糖耗在5g/l以下结束，过滤，分离菌体和乳酸钙，回收的菌体继续在催化反应器中以菌体培养液为催化体系，过量的碳酸钙作为中和剂，通过补加葡萄糖进行全细胞乳酸催化反应，如此循环，直至菌体催化效率降至50%以下；其中，通过补加葡萄糖进行全细胞乳酸催化反应具体为：当葡萄糖耗至5g/l以下，补加葡萄糖，每次补糖30-60g/l，继续在催化反应器中与菌体培养液进行催化反应，直至反应至菌体培养液基本成固状且糖耗在5g/l以下结束。

2.根据权利要求1所述的米根霉菌体全细胞催化制备L-乳酸的方法，其特征在于，补加葡萄糖总量为160-200 g/l。

3.根据权利要求1所述的米根霉菌体全细胞催化制备L-乳酸的方法，其特征在于全细胞乳酸催化反应过程中乳酸转化温度30℃，搅拌速度 100-150 r/min。

4. 根据权利要求1所述的米根霉菌体全细胞催化制备L-乳酸的方法，其特征在于米根霉菌体培养采用的条件为30℃，转速150-300 r/min，通气量0.5-1vvm，培养18-24h。

5.根据权利要求1所述的米根霉菌体全细胞催化制备L-乳酸的方法，其特征在于所述的菌体培养液为：葡萄糖 20-40 g/l，蛋白胨 3-5 g/l，KH₂PO₄ 0.2-0.4 g/l，MgSO₄·7H₂O0.2-0.4 g/l, 5L。

6.根据权利要求1所述的米根霉菌体全细胞催化制备L-乳酸的方法，其特征在于制备孢子液过程如下：将米根霉菌体放在马铃薯葡萄糖琼脂培养基中，在30℃的温度下培养7天，然后用无菌水把PDA表面的真菌孢子洗下来，浓度为1×10⁸个孢子/ml。