[发明专利]一种全血DNA提取试剂盒及提取方法

权利要求书

1.一种全血DNA提取试剂盒，其特征在于，包括裂解液、纳米磁珠、洗涤液A、洗涤液B和洗脱液。

2.如权利要求1所述的一种全血DNA提取试剂盒，其特征在于，所述裂解液包括异硫氰酸胍、碘化锂、柠檬酸三钠、Tween 20，所述纳米磁珠包括包裹有二氧化硅的Fe₃O₄,洗涤液A包括异硫氰酸胍、Tris-HCL和无水乙醇，所述洗涤液B包括Tris-HCL、NaCL和无水乙醇，所述洗脱液包括Tris-HCL、EDTA二钠。

3.如权利要求1-2所述的一种全血DNA提取试剂盒，其特征在于，所述裂解液pH值为4.0-7.0，包含浓度3-5mM的异硫氰酸胍、浓度1-5M的碘化锂、浓度50-200mM的柠檬酸三钠和1％-5％Tween 20。

4.如权利要求3所述的一种全血DNA提取试剂盒，其特征在于，所述纳米磁珠包括包裹有二氧化硅的Fe₃O₄，直径为200-2000nm，浓度为50-200mg/ml。

5.如权利要求3所述的一种全血DNA提取试剂盒，其特征在于，所述洗涤液A包含浓度1-4mM的异硫氰酸胍、pH 7.0-9.0浓度10-50mM的Tris-HCL和20％-50％的无水乙醇。

6.如权利要求3所述的一种全血DNA提取试剂盒，其特征在于，所述洗涤液B包含pH 7.0-9.0浓度1-5mM的Tris-HCL、浓度10-50mM NaCL和50％-80％的无水乙醇。

7.如权利要求3所述的一种全血DNA提取试剂盒，其特征在于，所述洗脱液包含pH为7.0-9.0浓度5-20mM的Tris-HCL和pH 8.0-9.0浓度0.5-3mM的EDTA二钠。

8.一种全血DNA提取试剂盒的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤S1：取50-200ul新鲜全血样本于1.5ml离心管中，使用无菌移液枪头向该离心管中加入100-500ul裂解液和50-200mg/ml的纳米磁珠10-30ul，震荡混匀1min，室温静置10min；

步骤S2：将步骤S1中的离心管置于磁力架上30s，待纳米磁珠完全吸至管壁之后，使用无菌移液枪头吸弃上清溶液；

步骤S3：使用无菌移液枪头向步骤S2离心管中加入500-800ul洗涤液A，将该离心管震荡混匀1min，置于磁力架上30s，待纳米磁珠完全吸至管壁之后，使用无菌移液枪头吸弃上清溶液；

步骤S4：使用无菌移液枪头向步骤S3离心管中加入500-800ul洗涤液B，将该离心管震荡混匀1min，置于磁力架上30s，待纳米磁珠完全吸至管壁之后，使用无菌移液枪头吸弃上清溶液，室温开盖干燥10-20min直至管内无液体残留；

步骤S5：使用无菌移液枪头向步骤S4离心管中加入100-300ul洗脱液，65℃水浴5-10min；

步骤S6：将步骤S5离心管震荡混匀1min，置于磁力架上30s，待纳米磁珠完全吸至管壁之后，使用无菌移液枪头吸取上清至新的离心管，即获得基因组DNA。