[发明专利]脂肪间充质干细胞向肝星状细胞和肝内皮细胞同时分化的培养基及方法

权利要求书

1.诱导脂肪间充质干细胞向肝星状细胞和肝内皮细胞同时分化的方法，其特征在于，包括：

第0天～第6天，脂肪间充质干细胞以培养基A培养；

第7天～第10天，以培养基B培养；

第11天～第14天，以培养基C培养；

第15天～第28天，以培养基D培养；

所述培养基A包括：基础培养基和Wnt3a蛋白20ng/mL～80ng/mL、Activin A蛋白50ng/mL～100ng/mL、地塞米松1μmol/L、ITS 2.5μL/mL和FBS 50μL/mL～200μL/mL；

所述培养基B包括：基础培养基和bFGF蛋白2.5ng/mL～10ng/mL、BMP4蛋白10ng/mL～50ng/mL、地塞米松1μmol/L、ITS 2.5μL/mL和FBS 50μL/mL；

所述培养基C包括：基础培养基和aFGF蛋白10ng/mL～50ng/mL、FGF4蛋白2.5ng/mL～10ng/mL、FGF8b蛋白10ng/mL～40ng/mL、地塞米松1μmol/L、ITS 2.5μL/mL和FBS 50μL/mL；

所述培养基D包括：基础培养基和HGF蛋白5ng/mL～20ng/mL、Follistatin蛋白25ng/mL～75ng/mL、地塞米松1μmol/L、ITS 2.5μL/mL和FBS 50μL/mL。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，

第0天～第2天，所述的培养基A中FBS的浓度为200μL/mL；

第3天～第6天，所述的培养基A中FBS的浓度为50μL/mL。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述培养的条件为：37℃，5％CO₂，每天更换60v％的新鲜培养基。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述培养的容器不以matrigel包被。