[发明专利]一种含枯草芽孢杆菌菌株SMXP-58的菌酶混合制剂

权利要求书

1.一种含枯草芽孢杆菌菌株SMXP-58的菌酶混合制剂，其特征在于，该混合制剂为枯草芽孢杆菌SMXP-58菌株培养液与淀粉酶和糖化酶的复配物；

该混合制剂中，枯草芽孢杆菌SMXP-58的活菌数为（10~11）×107个/mL，淀粉酶的酶活为500 U/mL，糖化酶的酶活为100 U/mL；

所述枯草芽孢杆菌SMXP-58菌株，属枯草芽孢杆菌属（Bacillus），最初是由2013年三门峡产的复烤烟叶中分离而来，其保藏名称为：枯草芽孢杆菌 SMXP-58，分类学名称为Bacillus subtilis SMXP-58，现保藏于武汉中国典型培养物保藏中心（CCTCC），保藏编号为CCTCC NO：M 2016083。

2.权利要求1所述含枯草芽孢杆菌菌株SMXP-58的菌酶混合制剂的制备方法，其特征在于，具体包括如下步骤：

（1）活化菌种，将SMXP-58菌株置于LB平板上，37℃条件下培养1~2d；

（2）制备种子液，刮取步骤（1）中所培养的菌体，接种于液体LB培养基中，30℃、150 rpm条件下于摇床过夜培养；

（3）扩大培养，将步骤（2）中种子液按1%的体积比转接液体LB培养基，30℃、150 rpm条件下培养至OD600=2.0；

（4）制备菌剂，将步骤（3）中发酵液3600 rpm离心10min，弃上清夜，然后加入无菌水进行充分悬浮，调整活菌数为（10~11）×107个/mL；

（5）制备菌酶混合制剂，将淀粉酶与糖化酶加入（4）中的菌剂中，调节淀粉酶、糖化酶的酶活分别为500 U/mL、100 U/mL，混合均匀。

3.权利要求1所述含枯草芽孢杆菌菌株SMXP-58的菌酶混合制剂在烟草薄片中的应用，其特征在于，用于降解烟草薄片中的果胶和淀粉。

4.如权利要求3所述含枯草芽孢杆菌菌株SMXP-58的菌酶混合制剂在烟草薄片中的应用，其特征在于，使用方法具体为：

造纸法烟草薄片制备过程中，按烟草薄片浸提液1~3%的质量比例，将制备好的菌酶混合剂制均匀喷洒于浸提液中，调节pH=5.5~6.5，25℃~35℃条件下作用6~10 h；然后按现有技术将浸提液进行浓缩并涂布于烟草薄片的片基，继续制作成烟草薄片。

5.如权利要求4所述含枯草芽孢杆菌菌株SMXP-58的菌酶混合制剂在烟草薄片中的应用，其特征在于，调节浸提液pH=6.0，30℃条件下作用8 h。