[发明专利]基于“一测多评”法的花椒麻味物质含量检测

说明书

技术领域

本发明涉及基于“一测多评”法的花椒麻味物质含量检测。

背景技术

花椒的麻味物质主要集中在花椒果皮的油腺细胞，研究表明，花椒中的不饱和脂肪酸酰胺类成分为花椒中的麻味物质。目前，已有学者从花椒中鉴定出了25种麻味物质，包括α-山椒素，β-山椒素，γ-山椒素，羟基-α-山椒素，羟基-β-山椒素，羟基-γ-山椒素等。其中，羟基-α-山椒素，羟基-β-山椒素，羟基-γ-山椒素是花椒中最主要的麻味物质。

花椒的麻味是花椒品质评价的主要的表现形式之一，目前仍没有市售的花椒麻味物质对照品，并且现行的花椒国家标准和地方标准没有对花椒的麻味进行客观定量评价。

因此，有必要对花椒中麻味成分进行分离，通过同时测定多个麻味物质指标性成分，实现对花椒中的麻味物质含量检测。

发明内容

为解决上述问题，本发明提供基于“一测多评”法的花椒麻味物质含量检测，包括以下步骤：

(1)羟基-β-山椒素标准曲线的建立：

a、对照品溶液的制备：

取羟基-β-山椒素对照品，加甲醇配制成对照品溶液；

b、对照品溶液的测定：

配制系列浓度的对照品溶液，分别注入高效液相色谱仪，测定各色谱峰峰面积，得到羟基-β-山椒素的标准曲线；

色谱条件如下：

检测波长：270±5nm；

色谱柱：C₁₈色谱柱；

流动相：乙腈：水＝40％：60％；

(2)待测样品中羟基-β-山椒素的含量测定：

c、供试品溶液的制备：

取待测样品，加甲醇提取，过滤得供试品溶液；

d、供试品溶液的测定：

取供试品溶液，注入高效液相色谱仪，以步骤b相同的色谱条件检测，根据步骤(1)的标准曲线得到待测样品中羟基-β-山椒素的含量；

(3)使用相对校正因子计算待测样品中羟基-α-山椒素和羟基-γ-山椒素含量。

进一步地，所述C₁₈色谱柱为Phenomenex C₁₈色谱柱、Waters Bridge C₁₈或Agilent Eclipse Plus C₁₈色谱柱。

进一步地，所述色谱柱的规格为250mm×4.6mm，5μm。

进一步地，所述高效液相色谱仪为Agilent 1260、岛津LC-2010A或Waters e2695。

进一步地，步骤c中，所述提取是超声提取。

进一步地，所述超声提取的时间为30分钟。

进一步地，步骤c中，所述甲醇与待测样品的体积质量比为100mL：1g。

进一步地，所述色谱条件的柱温为20～30℃，优选30℃。

进一步地，所述色谱条件的流速为0.6～1.0mL·min^-1，优选1.0mL·min^-1。

进一步地，所述步骤(3)的相对校正因子是通过下述步骤得到的：

取羟基-α-山椒素、羟基-γ-山椒素和羟基-β-山椒素对照品，加甲醇配制成混合对照品溶液；

取混合对照品溶液，注入高效液相色谱仪，以步骤b相同的色谱条件检测，得到羟基-α-山椒素、羟基-γ-山椒素和羟基-β-山椒素的标准曲线；

以羟基-β-山椒素为内参物，根据相对响应因子f计算公式：计算羟基-α-山椒素、羟基-γ-山椒素与羟基-β-山椒素之间的相对应因子，取其均值；

其中，相对响应因子f计算公式如下：

式中A为色谱峰面积、W为成分的质量浓度，下标n代表待测成分，下标s代表内参物。

本发明还提供了本发明的含量检测用于检测花椒、花椒油、藤椒、藤椒油及其产品中麻味物质的含量检测。

经试验证明，本发明色谱条件可以有效将羟基-α-山椒素，羟基-β-山椒素，羟基-γ-山椒素分离，从而准确测定它们的含量。并且，本发明的“一测多评”法与外标法相互验证，无明显差异，结果可靠。