[发明专利]活性提高的α-淀粉酶AmyL突变体及其编码基因和应用有效
| 申请号： | 201710032308.8 | 申请日： | 2017-01-16 |
| 公开（公告）号： | CN106754826B | 公开（公告）日： | 2019-08-27 |
| 发明（设计）人： | 李阳源;黄江;王建荣;聂金梅;陈丽芝;何小梅;杨玲;黄佳乐 | 申请（专利权）人： | 广东溢多利生物科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/28 | 分类号： | C12N9/28;C12N15/56;C12N15/81;C12N1/19;C12R1/84 |
| 代理公司： | 北京法思腾知识产权代理有限公司 11318 | 代理人： | 高宇 |
| 地址： | 519060 广东省*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 活性 提高 淀粉酶 amyl 突变体 及其 编码 基因 应用 | ||
1.一种活性提高的α-淀粉酶突变体，其特征在于，所述突变体为氨基酸序列如SEQ IDNO.1所示的α-淀粉酶的发生以下突变而得，第18位N,第39位S,第159位Y,第220位T,第281位N,第363位S，以及第474位Y突变成第18位D,第39位N,第159位D,第220位K,第281位D,第363位C,以及第474位K。
2.一种活性提高的α-淀粉酶突变体基因，其特征在于，编码权利要求1所述的活性提高的α-淀粉酶突变体。
3.如权利要求2所述的活性提高的α-淀粉酶突变体基因，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。
4.一种提高α-淀粉酶酶活的方法，其特征在于，将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的α-淀粉酶的第18位用D替代N，第39位用N替代S，第159位用D替代Y，第220位用K替代T，第281位用D替代N，第363位用C替代S,以及第474位用K替代Y。
5.包含权利要求2或3所述的活性提高的α-淀粉酶突变体基因的重组载体。
6.包含权利要求2或3所述的活性提高的α-淀粉酶突变体基因的重组菌株。
7.一种制备权利要求1所述活性提高的α-淀粉酶突变体的方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)用权利要求5所述的重组载体转化宿主细胞，得到重组菌株；
2)重组菌株进行发酵，诱导重组α-淀粉酶的表达；
3)发酵结束后，回收并纯化所表达的α-淀粉酶突变体。
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