[发明专利]一种基于实时定量PCR的贝类性别鉴定的方法有效
| 申请号： | 201710032340.6 | 申请日： | 2017-01-16 |
| 公开（公告）号： | CN106701963B | 公开（公告）日： | 2020-07-24 |
| 发明（设计）人： | 张玲玲;李若佼;包振民;张美溦;张阳;王师;胡晓丽 | 申请（专利权）人： | 中国海洋大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12Q1/686 |
| 代理公司： | 青岛海昊知识产权事务所有限公司 37201 | 代理人： | 曾庆国 |
| 地址： | 266000 *** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 基于 实时 定量 pcr 贝类 性别 鉴定 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种基于实时定量PCR的栉孔扇贝性别鉴定的方法，其特征是：首先提取所需性别鉴定贝类个体的性腺总RNA，反转录合成cDNA，然后设计两对贝类雌雄性别表征基因的特异性引物，实时定量PCR检测其表达量，用2-△Ct方法计算雄性与雌性表征基因的相对表达量，进行LOG10转换，确定性别；
所述的两对贝类雌雄性别表征基因是FOXL2和DMRT；
所述的用2-△Ct方法计算雄性与雌性表征基因的相对表达量，进行LOG10转换，确定性别；如果获得的LOG10(DMRT/FOXL2)数值大于2，则该个体为雄性；如果获得的LOG10(DMRT/FOXL2)数值小于0，则该个体为雌性；
其中栉孔扇贝FOXL2和DMRT基因的特异性引物的序列如下：
FOXL2 F:CCTAAGGTGGAGATGTGTGGACGAG、
R:AATACAGTCCAAGGCAAGTGGTCGT、
DMRT F:CTCCCCTTCGCTCCCCTAA、
R:GCAGAATCGCTTGTGCCCCT。
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