[发明专利]一种提高酪酸菌发酵生长效率的补料方法

权利要求书

1.一种提高酪酸菌发酵生长效率的补料方法，其特征在于：所述的方法为：在酪酸菌发酵培养6 h时开始进行指数流加葡萄糖溶液至13 h，比生长速率设定在0.1-0.4 h^-1。

2.根据权利要求1所述的提高酪酸菌发酵生长效率的补料方法，其特征在于：比生长速率设定为0.225 h^-1。

3.根据权利要求2所述的提高酪酸菌发酵生长效率的补料方法，其特征在于：葡萄糖溶液的浓度为500 g/L，葡萄糖溶液的流加速率如下：发酵6-7 h流加速率为210 mL/h，发酵7-8 h流加速率为260 mL/h，发酵8-9 h流加速率为330 mL/h，发酵9-10 h流加速率为410 mL/h，发酵10-11 h流加速率为510 mL/h，发酵11-12 h流加速率为640 mL/h，发酵12-13 h流加速率为800 mL/h。

4.根据权利要求1所述的提高酪酸菌发酵生长效率的补料方法，其特征在于：包括如下步骤：

（1）种子扩大培养与合瓶种子细胞的收集

按无菌、无氧操作要求，从酪酸菌菌种冻干管接出细胞至新制备的厌氧管斜面培养基；36-38℃培养12-16 h后，按无菌、无氧操作要求，加入10 mL无菌、无氧水制备厌氧管种子液；

120 mL厌氧瓶装培养基60 mL，按1-2%的比例将酪酸菌厌氧管种子液接入厌氧瓶培养基中，36-38℃、100 r/min在摇床上培养12-14 h得到厌氧瓶种子液；按无菌、无氧操作要求，将厌氧瓶种子液进行合瓶操作，得到合瓶种子液；

（2）发酵培养

装有培养基的发酵罐灭菌、氮气置换除氧后，将合瓶种子液以1-2%的接种量火焰保护接入发酵罐，按如下条件进行发酵培养：发酵温度36-38℃，转速100 r/min，氮气流量控制为0.1 vvm，罐压控制为0.03-0.04 MPa，厌氧保护1 h后，停止通氮气；发酵培养12-14 h后，放罐；发酵6 h开始，将比生长速率设定为0.1-0.4 h^-1进行指数流加葡萄糖溶液至13 h。

5.根据权利要求4所述的提高酪酸菌发酵生长效率的补料方法，其特征在于：步骤（2）中，比生长速率的设定值为0.225 h^-1，葡萄糖溶液的浓度为500 g/L，葡萄糖溶液的流加速率如下：发酵6-7 h流加速率为210 mL/h，发酵7-8 h流加速率为260 mL/h，发酵8-9 h流加速率为330 mL/h，发酵9-10 h流加速率为410 mL/h，发酵10-11 h流加速率为510 mL/h，发酵11-12 h流加速率为640 mL/h，发酵12-13 h流加速率为800 mL/h。

6.根据权利要求4所述的提高酪酸菌发酵生长效率的补料方法，其特征在于：所述的培养基的配方为：葡萄糖20 g/L，蛋白胨30 g/L，酵母粉5 g/L，磷酸氢二钾0.5 g/L，七水硫酸镁0.5 g/L，轻质碳酸钙1 g/L，一水硫酸锰0.02 g/L，pH7.3；厌氧管斜面培养基需另外加入琼脂，琼脂浓度20 g/L，pH 7.3。

7.根据权利要求1-6任一项所述的提高酪酸菌发酵生长效率的补料方法，其特征在于：所述的酪酸菌的保藏编号为CCTCC NO：M 2016628。

8.一种酪酸菌，其特征在于：保藏编号为CCTCC NO：M 2016628。