[发明专利]应用RPA技术对转基因玉米BT11品系特异性鉴定在审
| 申请号： | 201710047213.3 | 申请日： | 2017-01-22 |
| 公开（公告）号： | CN106755488A | 公开（公告）日： | 2017-05-31 |
| 发明（设计）人： | 李亮;李凯;宛煜嵩;董美;金芜军;刘卫晓;潘海会;温洪涛;王永;高进;王迪 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院生物技术研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京中誉威圣知识产权代理有限公司11279 | 代理人： | 叶立涛,司丽春 |
| 地址： | 100081 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 应用 rpa 技术 转基因 玉米 bt11 品系 特异性 鉴定 | ||
【权利要求书】：
1.一种应用RPA技术对转基因玉米BT11品系特异性鉴定的引物和探针，其特征在于，所述正向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，反向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示，探针的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示。
2.一种鉴定转基因玉米BT11品系的试剂盒，其特征在于，包含权利要求1所述的引物和探针。
3.一种应用RPA技术对转基因玉米BT11品系特异性鉴定的方法，其特征在于，提取待测样品的DNA作为模板，利用权利要求1所述的引物及探针进行RPA快速扩增及实时荧光检测，如果得到扩增曲线，则证明所检样品含有转基因玉米BT11成分；如果得不到扩增曲线，则证明所检样品不含有转基因玉米BT11成分。
4.根据权利要求3所述的应用RPA技术对转基因玉米BT11品系特异性鉴定的方法，其特征在于，所述RPA快速扩增的反应体系为50μl，包括10μmol/L的引物各2μl，10μmol/L的探针0.5μl，模板DNA 50ng，缓冲溶液Buffer 29.5μl，其余用去离子水补齐。
5.根据权利要求4所述的应用RPA技术对转基因玉米BT11品系特异性鉴定的方法，其特征在于，所述RPA快速扩增及实时荧光检测的程序为：RPA扩增检测仪或荧光定量PCR仪于39摄氏度反应20分钟；同时进行实时荧光检测。
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