[发明专利]一种翘嘴鲌、三角鲂及其杂交子代分子鉴定的方法有效
申请号: | 201710048084.X | 申请日: | 2017-01-20 |
公开(公告)号: | CN106868112B | 公开(公告)日: | 2019-12-06 |
发明(设计)人: | 蒋文枰;顾志敏;贾永义;刘士力;迟美丽;郭建林;唐永凯;李建林 | 申请(专利权)人: | 浙江省淡水水产研究所 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12Q1/6869 |
代理公司: | 11350 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人: | 汤东凤<国际申请>=<国际公布>=<进入 |
地址: | 313000 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
权利要求书: | 查看更多 | 说明书: | 查看更多 |
摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 翘嘴鲌 三角 及其 杂交 子代 分子 鉴定 方法 | ||
1.一种翘嘴鲌、三角鲂及其杂交子代分子鉴定的方法,包括如下步骤:
(1)分别提取翘嘴鲌、三角鲂及其杂交子代的基因组DNA;
(2)以ITS1基因设计通用引物对1,进行PCR扩增,克隆测序获得翘嘴鲌、三角鲂及其杂交子代的ITS1基因部分序列;
(3)根据得到的ITS1基因序列,设计通用引物对2进行PCR扩增,根据凝胶电泳产物片段大小来判断翘嘴鲌、三角鲂及其杂交子代;
通用引物对1正义链5’-3’为AGTCGTAACAAGGTTTCCGTAG,反义链5’-3’为GCACGAGCCGAGTGATCCA;通用引物对2正义链5’-3’为TCGTAACAAGGTTTCCGTAGGTG,反义链5’-3’为GTCGGGGGTGTCTCTCGCCA。
2.根据权利要求1所述的翘嘴鲌、三角鲂及其杂交子代分子鉴定的方法,其特征在于:步骤(3)中,判断方法具体为:产物片段256bp为三角鲂,产物片段201bp为翘嘴鲌,产物片段同时含有256bp和201bp则为杂交子代。
3.根据权利要求1所述的翘嘴鲌、三角鲂及其杂交子代分子鉴定的方法,其特征在于:杂交子代同时含有翘嘴鲌、三角鲂ITS1基因序列,如实施例1中序列1、序列2所示。
4.根据权利要求1所述的翘嘴鲌、三角鲂及其杂交子代分子鉴定的方法,其特征在于:所述的第2步中PCR扩增的程序是:95℃ 3min、30循环(94℃ 30s、57℃ 30s、72℃ 30s)、72℃延长5min,4℃度保存。
5.根据权利要求1所述的翘嘴鲌、三角鲂及其杂交子代分子鉴定的方法,其特征在于:所述的在第3步中,PCR扩增的程序是:95℃ 3min、30循环(94℃ 25s、59℃ 25s、72℃ 25s)、72℃延长5min,4℃度保存。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于浙江省淡水水产研究所,未经浙江省淡水水产研究所许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服】
本文链接:http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201710048084.X/1.html,转载请声明来源钻瓜专利网。