[发明专利]重组的人源Ang‑1在制备药物中的用途

说明书

技术领域

本发明涉及细胞因子的用途技术领域，尤其涉及重组的人源Ang-1在制备保护猪内皮细胞免于人抗体介导的补体依赖型细胞毒性的药物中的用途。

背景技术

人类器官供体的缺乏是器官移植的最主要的限制之一。猪器官被认为是解决这个问题的最适宜的供体来源。可是，在猪器官移植到灵长类动物中，凝血调节紊乱和炎症反应仍然是一个问题。血管内皮细胞，这类细胞与人类免疫细胞的相互作用在异种移植中具有重要的作用。内皮细胞损伤和功能性失调在炎症与凝血反应的发展中具有重要的影响因素，并且在灵长类动物或者人类受体中，能够影响后来猪异种移植后的存活时间。在血清中，异源抗体，例如，Gal抗体和Neu5Gc抗体，能够诱导由抗体介导的依赖于补体的细胞毒性，进而导致内皮细胞的损伤。在炎症反应中，细胞因子起重要的作用。在以前的报道中发现人源IL-4和IL-13，而不是IL-11，TGF-β₂或者IL-10，保护猪内皮细胞防止通过激活的PI3K/AKT信号途径而进行的人类抗体介导的补体依赖型细胞毒性(CDC)。可是，这些细胞因子抑制或者促进内皮细胞毒性，是否是通过人类抗体介导的补体依赖型细胞毒性，人们仍然是不清楚的。在血管发育中血管生成素具有重要的作用并且它们可以稳定其整体性。血管生成素1(Ang-1)是一种对内皮血管特异性受体酪氨酸激酶2的特异配体，这个激酶在血管成熟和血管重塑中具有重要的意义。Ang-1/Tie2途径能够增强血管的整体性和通过激活PI3K/AKT信号途径的从而促进内皮细胞的存活时间。Ang-2与Ang1共用Tie2受体，在与Ang1共通作用下，同样的被认为在血管增长和血管重塑过程具有重要的作用。对于Tie2，Ang-1被认为是一种激动剂，而Ang-2被认为是拮抗剂，起相反的作用。

发明内容

发明人研究发现，Ang-1和Ang-2保护猪内皮细胞防止通过激活的PI3K/AKT信号途径而进行的人类抗体介导的补体依赖型细胞毒性。Ang-1和Ang-2不能改变IgM或者IgG对于PIECs的结合，以及在Ang-1和Ang-2处理下不能上调表达PIECs补体调节因子(CD46、CD55和CD59)。

基于以上发现，本发明提供一种重组的人源Ang-1在制备保护猪内皮细胞免于人抗体介导的补体依赖型细胞毒性的药物中的用途。

进一步地，上述猪内皮细胞是猪髂骨动脉内皮细胞。

进一步地，上述重组的人源Ang-1是通过腺病毒介导表达的人源Ang-1。

进一步地，上述腺病毒介导表达的过程中，通过实时定量PCR和/或半定量PCR检测人源Ang-1的mRNA的表达水平。

进一步地，上述实时定量PCR和/或半定量PCR所使用的用于检测人源Ang-1的引物对是：

5’-aaacatgaagtcggagatgg-3’(SEQ ID NO:1)和

5’-ttctccagcagctgtatctc-3’(SEQ ID NO:2)。

进一步地，上述实时定量PCR和/或半定量PCR以GAPDH作为内参，用于检测上述内参的引物对是：

5’-acagacagccgtgtgttcc-3’(SEQ ID NO:5)和

5’-accttcaccatcgtgtctca-3’(SEQ ID NO:6)。

进一步地，上述重组的人源Ang-1通过激活PI3K/AKT通路来保护猪内皮细胞免于人抗体介导的补体依赖型细胞毒性。

基于本发明的发现，Ang-1和Ang-2保护PIECs免于人源抗体介导的CDC，因此Ang-1和Ang-2可以作为制备保护猪内皮细胞免于人抗体介导的补体依赖型细胞毒性的药物的重要活性成分。

附图说明