[发明专利]一种从米糠中提取活性蛋白的方法

权利要求书

1.一种从米糠中提取活性蛋白的方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：

1）预处理：在米糠中加入异丙醇，搅拌，加入正己烷浸提，调浆，倒入胶体磨，离心，取米糠粕真空脱溶，得脱脂米糠粕；

2）酶解和提取：在米糠粕中加蒸馏水，微波提取，调pH，加入米糠粨1~2%重量份的复合酶，搅拌，灭酶，离心取上清液；

3）分离纯化：超滤，凝胶层析，冷冻干燥，得活性蛋白。

2.根据权利要求1所述的一种从米糠中提取活性蛋白的方法，其特征在于：所述步骤1中的米糠与异丙醇的体积比为1：2.5~6.3，米糠与正己烷的体积比为1：2.7~6.2；

所述步骤2）中蒸馏水中含有0.1~0.1%的苯氧基乙醇和0.01~0.1%的对氨基苯甲酸盐。

3.根据权利要求1所述的一种从米糠中提取活性蛋白的方法，其特征在于：所述步骤1中调浆后倒入胶体磨8~22min，于3200~4800r/min离心8~25min，得米糠粕和混合油，取米糠粕，真空脱溶的真空度为0.05~0.2MPa，温度为40~60℃。

4.根据权利要求1所述的一种从米糠中提取活性蛋白的方法，其特征在于：所述步骤2中加入米糠重量30~45倍的蒸馏水，微波提取的微波功率为350~450w，在45~55℃下微波提取2~3次，每次30~50min。

5.根据权利要求1所述的一种从米糠中提取活性蛋白的方法，其特征在于：所述步骤2中调pH至5.8~6.3，所述复合酶由纤维素酶2~5份、糖化酶2~5份、木瓜蛋白酶2~5份、乙醛脱氢酶0.2~0.7份、单宁酶0.6~1份、单甘脂 0.1~0.3份，搅拌酶解时间为50~80min。

6.根据权利要求1所述的一种从米糠中提取活性蛋白的方法，其特征在于：所述步骤3超滤的滤膜截留分子量为8000~14000Da，超滤压力为4×10⁴Pa。

7.根据权利要求1所述的一种从米糠中提取活性蛋白的方法，其特征在于：所述步骤3中凝胶层析的凝胶悬液由凝胶、磷酸氢二钠和减盐缓冲液组成，凝胶与减盐缓冲液的质量比为1：0.3：1~3，所述碱盐缓冲液为体积比例为1：0.8~3.6混合的0.02~0.4mol/L NaOH溶液和含有0.05~0.8mol/L NaCl的PBS磷酸盐缓冲溶液。

8.根据权利要求1所述的一种从米糠中提取活性蛋白的方法，其特征在于：所述步骤3中凝胶层析后在洗脱液中加入碘颜色反应和茚三酮反应，收集有显色反应的洗脱液。