[发明专利]一种从米糠中提取活性蛋白的方法

说明书

技术领域

本发明属于天然产物提取技术领域，具体涉及一种从米糠中提取活性蛋白的方法。

背景技术

米糠是稻谷加工中最重要的一类副产品。米糠不仅含有丰富的脂质（16~22%）、粗蛋白（12~16%），还含有多种天然活性物质，如植酸、谷维素、γ- 氨基丁酸、脂多糖、生育酚等。目前我国米糠年产量已达到1800万吨，但利用率只有10%，大部分作为低价值饲料使用，造成了极大浪费。

米糠蛋白是一种营养价值很高的植物蛋白质，其中可溶性蛋白约占70%，必需氨基酸组成接近人体需要模式，且赖氨酸和蛋氨酸含量高于大米及其它谷物含量，可弥补谷物蛋白某些氨酸酸不足的缺陷。

现有技术如，中国发明授权专利，授权公告号CN 103351422 B，该发明公开了一种从糙米或/和米糠中提取天然生物活性蛋白的方法，包括：将糙米或/和米糠经脱脂处理得到脱脂米粉；将脱脂米粉与氯化钠水溶液混合，然后经振荡提取、第一分离收集上清液，即为总盐溶性蛋白溶液；向总盐溶性蛋白溶液加入乙醇，混合均匀，经静置、第二分离后除去沉淀部分，得到生物活性蛋白溶液；将生物活性蛋白溶液经后处理除乙醇、除盐分以及干燥后得到天然生物活性蛋白。该发明方法采用氯化钠和乙醇两种食品级原料，能够从糙米或/和米糠中提取天然生物活性蛋白，低成本，无污染。该发明方法制备的天然生物活性蛋白，可以用作制备保健食品、作为食品添加剂和应用到化妆品中，具有广阔的应用前景，但该提取方法略为简单，提取到的提取物中活性蛋白可能不太高，含有杂质。

现有技术如，中国发明授权专利，授权公告号CN 103833786 B，该发明提供一种米糠营养和活性物质的高效提取方法。该方法包括（1）全脂米糠筛分除杂；（2）酸浸泡提取植酸；（3）高速剪切辅助复配溶剂浸提米糠毛油；（4）酶法提取米糠蛋白。该发明方法可从全脂米糠中先后高效的提取出植酸、脂肪和蛋白质，实现了全脂米糠的高值化全利用，提高其附加值，避免资源浪费，但该发明提取米糠活性蛋白的纯度不高，在提取率上还具有提升空间。

发明内容

本发明针对上述技术问题提供一种从米糠中提取活性蛋白的方法，对米糠进行脱脂、酶解、分离纯化，提高得到提取物的活性蛋白含量，得到的活性蛋白纯度高，提高了米糠的利用价值，避免资源浪费。

本发明针对上述技术问题所采取的方案为：一种从米糠中提取活性蛋白的方法，方法包括以下步骤：

1）预处理：在米糠中加入异丙醇，搅拌，加入正己烷浸提，调浆，倒入胶体磨，离心，取米糠粕真空脱溶，得脱脂米糠粕；

2）酶解和提取：在米糠粕中加蒸馏水，微波提取，调pH，加入米糠粨1~2%重量份的复合酶，搅拌，灭酶，离心取上清液；

3）分离纯化：超滤，凝胶层析，冷冻干燥，得活性蛋白；本发明对米糠进行脱脂、微波提取，酶解、分离纯化，提高得到提取物的活性蛋白含量，得到的活性蛋白纯度高。

步骤2）中蒸馏水中含有0.1~0.1%的苯氧基乙醇和0.01~0.1%的对氨基苯甲酸盐。

作为优选，步骤1中的米糠与异丙醇的体积比为1：2.5~6.3，米糠与正己烷的体积比为1：2.7~6.2，通过高速剪切辅助复配溶剂浸提的方法，对米糠中的脂肪进行分离。

作为优选，步骤1中调浆后倒入胶体磨8~22min，于3200~4800r/min离心8~25min，得米糠粕和混合油，取米糠粕，真空脱溶的真空度为0.05~0.2MPa，温度为40~60℃， 脱除米糠中的脂肪和杂质。

作为优选，步骤2中加入米糠重量30~45倍的蒸馏水，微波提取的微波功率为350~450w，在45~55℃下微波提取2~3次，每次30~50min，使细胞内部的温度将迅速上升，从而使细胞内部的压力超过细胞壁膨胀所能承受的能力，结果细胞破裂，其内的有效成分自由流出。

作为优选，步骤2中调pH至5.8~6.3，复合酶由纤维素酶2~5份、糖化酶2~5份、木瓜蛋白酶2~5份、乙醛脱氢酶0.2~0.7份、单宁酶0.6~1份、单甘脂 0.1~0.3份，搅拌酶解时间为50~80min，利用复合酶可降解多种蛋白质，提高蛋白质的提取率和纯度，复合酶的酶解效率高而且酶解时间快，效果好。

作为优选，步骤3超滤的滤膜截留分子量为8000~14000Da，超滤压力为4×10⁴Pa，去除多肽、多糖和盐以获得高纯度的活性蛋白。