[发明专利]一种提取红豆活性蛋白的方法

权利要求书

1.一种提取红豆活性蛋白的方法，其特征在于，包括以下提取步骤：

1）选取新鲜红豆，将新鲜红豆置于2-4倍的清水中浸泡，研磨粉碎至150-240目，得红豆浆；

2）在红豆浆中加入复合酶，酶解3.6-4.7h后灭酶10-22min，搅拌，回流浸提3-4次，合并得浸提液；

3）在浸提液中加入92-96%的乙醇，搅拌，浸泡14-22h，得沉淀物；

4）将沉淀物置于去离子水中并加入0.02-0.04%的脱色剂溶解，离心，超滤膜过滤，得粗制蛋白液；

5）将粗制蛋白液通过大孔树脂纯化，得洗脱液，干燥，得红豆活性蛋白。

2.根据权利要求1所述的一种提取红豆活性蛋白的方法，其特征在于：所述提取步骤1~5中溶液均处于低温状态，温度为1-5℃，其中步骤2中酶解时温度提升至51-54℃。

3.根据权利要求1所述的一种提取红豆活性蛋白的方法，其特征在于：所述步骤1中选取的新鲜红豆均为除去豆皮的新鲜红豆，浸泡时间为10-18h。

4.根据权利要求1所述的一种提取红豆活性蛋白的方法，其特征在于：所述步骤2中所加入得复合酶为：通过纤维素酶和果胶酶按1:2-3.7的比例制备的混合物。

5.根据权利要求1所述的一种提取红豆活性蛋白的方法，其特征在于：所述步骤2中还需加入蛋白酶抑制剂，蛋白酶抑制剂为二异丙基氟磷酸或碘乙酸或亮肽素中的一种或两种。

6.根据权利要求1所述的一种提取红豆活性蛋白的方法，其特征在于：所述步骤3中乙醇加入量为浸提液得2-4倍。

7.根据权利要求1所述的一种提取红豆活性蛋白的方法，其特征在于：所述步骤4中脱色剂的成分及其重量份为：无水乙醇50-60份，硅藻土15-25份，活性炭15-25份，游离酸1-5份，氰钴胺0.1-0.2份，硫氰酸胍0.01-0.02份。

8.根据权利要求1所述的一种提取红豆活性蛋白的方法，其特征在于：所述步骤4中超滤膜过滤采用截留分子量为6000～10000Dal的超滤膜。

9.根据权利要求1所述的一种提取红豆活性蛋白的方法，其特征在于：所述步骤5中大孔树脂纯化时先用92-95%的乙醇溶液以1-2.2BV/h的洗脱流速进行洗脱，再用84-90%的乙醇溶液以1.3-2.3BV/h的洗脱流速进行洗脱，最后用蒸馏水以1.4-2.7BV/h的洗脱流速进行洗脱。