[发明专利]一种提取红豆活性蛋白的方法

说明书

技术领域

本发明涉及活性蛋白提取技术领域，尤其是一种提取红豆活性蛋白的方法。

背景技术

红豆即海红豆(学名:Adenanthera pavonina Linn. var. microsperma)豆科海红豆属，乔木，羽装复叶，小叶长椭圆，圆锥花序，花白色，荚果扁平，种子鲜红色，心材暗褐色，质坚而耐腐，可为支柱、船舶、建筑用材和箱板，种子鲜红色而光亮，甚为美丽，可作装饰品，红豆养心，自古就认为如果心火过旺，则很有可能会引发口疮疖肿、头晕、心悸、烦躁等不适症状。而红豆则具有清热去湿、消肿解毒、补血安神的功效，因此夏天的时候人们都会煮红豆或者绿豆汤来解暑，也就是这个原因了，薏米红豆粥也有有止血调理、清热解毒的功能。

在现有蛋白质提取技术中，例如一种提取绿豆活性蛋白的方法，CN102860406A，其包括：将绿豆浸泡、冻结与脱皮后与水按照质量比1:2-3 的比例充分混合，然后将其进行充分研磨得到绿豆浆；将所述绿豆浆冷却至0℃-4℃，然后将其加入胶体磨内充分研磨八至十个循环得到料浆；将所述料浆在常温下静置后进行离心分离、低温浓缩与干燥浓缩后，制得淡黄色的绿豆活性蛋白质粉末，该发明通过脱皮、研磨、离心、溶出等物理提取方法，将蛋白与淀粉分离，提高了绿豆活性蛋白的制得率，该方法提取的活性蛋白的得率可高达86.7%，纯度高达93.2%，在提取过程无需添加化学试剂，使该发明产品绿色环保，无污染。

该发明的提取活性蛋白步骤中，尚未去除蛋白质中的色素，制备相对简单，提取的活性蛋白纯度相对较低。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于提供一种提取纯度较高，蛋白含量优质，制备简便的一种提取红豆活性蛋白的方法。

为解决上述现有的技术问题，本发明采用如下方案：一种提取红豆活性蛋白的方法，包括以下提取步骤：

1）选取新鲜红豆，将新鲜红豆置于2-4倍的清水中浸泡，研磨粉碎至150-240目，得红豆浆；

2）在红豆浆中加入复合酶，酶解3.6-4.7h后灭酶10-22min，搅拌，回流浸提3-4次，合并得浸提液；

3）在浸提液中加入92-96%的乙醇，搅拌，浸泡14-22h，得沉淀物；

4）将沉淀物置于去离子水中并加入0.02-0.04%的脱色剂溶解，离心，超滤膜过滤，得粗制蛋白液；

5）将粗制蛋白液通过大孔树脂纯化，得洗脱液，干燥，得红豆活性蛋白。

作为优选，提取步骤1~5中溶液均处于低温状态，温度为1-5℃，其中步骤2中酶解时温度提升至51-54℃，在低温中提取可防止蛋白质的降解，可提高提取蛋白质的纯度。

作为优选，步骤1中选取的新鲜红豆均为除去豆皮的新鲜红豆，浸泡时间为10-18h，去除豆皮便于红豆与水接触，提高红豆有机物的溶解速度。

作为优选，步骤2中所加入得复合酶为：通过纤维素酶和果胶酶按1:2-3.7的比例制备的混合物，按该比例制备的复合酶更有效的提高酶解效果。

作为优选，步骤2中还需加入蛋白酶抑制剂，蛋白酶抑制剂为二异丙基氟磷酸或碘乙酸或亮肽素中的一种或两种，在加温酶解时防止蛋白质的降解。

作为优选，步骤3中乙醇加入量为浸提液得2-4倍，促使易容与乙醇的成分在乙醇中充分溶解，使蛋白质等一些不溶于高浓度乙醇的沉淀，起到分离作用。

作为优选，步骤4中脱色剂的成分及其重量份为：无水乙醇50-60份，硅藻土15-25份，活性炭15-25份，游离酸1-5份，氰钴胺0.1-0.2份，硫氰酸胍0.01-0.02份，去除蛋白质中含有的色素，提高提取蛋白质的纯度。

作为优选，步骤4中超滤膜过滤采用截留分子量为6000-10000Dal的超滤膜，去除杂质，体高纯度。

作为优选，步骤5中大孔树脂纯化时先用92-95%的乙醇溶液以1-2.2BV/h的洗脱流速进行洗脱，再用84-90%的乙醇溶液以1.3-2.3BV/h的洗脱流速进行洗脱，最后用蒸馏水以1.4-2.7BV/h的洗脱流速进行洗脱，进行梯度洗过，纯化浓度更高。

有益效果：本发明提供的这种提取红豆活性蛋白的方法，去除了活性蛋白质内的色素，提高了活性蛋白质的纯度，提取步骤简单，操作方便。氰钴胺和硫氰酸胍通过活性炭具有促进色素脱除的作用，从而使蛋白纯度更高，本发明采用了上述技术方案提供一种提取红豆活性蛋白的方法，弥补了现有技术的不足，设计合理，操作方便。

具体实施方式

以下实施例作进一步详细描述：

实施例1：

一种提取红豆活性蛋白的方法，包括以下提取步骤：