[发明专利]一种病毒RNA的提取试剂盒和提取方法

权利要求书

1.一种病毒RNA的提取试剂盒，其特征在于，由裂解结合液A、洗涤液B、洗脱液C和消解液D组成，所述裂解结合液A含有20～50mM蔗糖，20～50mM硫酸铵，10～50mM Tris-HCl，1～5％V/V Brij-58，0.2～0.5mg/mL磁珠， pH值为4.5～5.5； 所述洗涤液B含有1～5％V/VBrij-58，5～25mM Tris-HCl，0.5～1mg/mL蛋白酶K，pH值为6～7；所述洗脱液C含有10～20mM Tris-HCl，0.5mM EDTA，pH值为8.5；所述消解液D含有20mg/mL蛋白酶K。

2.根据权利要求1所述的病毒RNA的提取试剂盒，其特征在于，所述磁珠的粒径为0.5～1μm。

3.一种利用权利要求1或2所述试剂盒进行核酸提取的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1.取病毒样本，加入消解液D和裂解结合液A，混匀离心后，吸弃上清液；

S2.加入洗涤液B，混匀10min离心后，再次吸弃上清液；

S3.加入洗涤液B，混匀1min离心后，再次吸弃上清液；

S4.加入洗脱液C，温浴一段时间，温浴期间震荡混匀，离心后，吸取上清液至新的离心管即得病毒RNA。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，S1所述样本和裂解结合液A的混合体积比为1：3。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，S4所述温浴的条件为56～75℃，洗脱液C的加入体积为50～100μL。

6.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，S2和S3所述洗涤液B的加入体积为300～600μL。